2) ЦПХ-агар
3) кровяной агар (+)
4) сахарно-дрожжевой агар
Для оценки гемолитической активности стрептококков применяют кровяной агар, обычно с добавлением около 5% дефибринированной крови барана. На такой среде эритроциты служат субстратом для действия гемолизинов, а результат выявляют по изменению окраски и прозрачности агара вокруг колоний. Полный лизис эритроцитов формирует прозрачную зону β-гемолиза, частичный — зеленоватую зону α-гемолиза.
Характер гемолиза является важным культуральным признаком при первичной идентификации стрептококков: β-гемолиз типичен, например, для Streptococcus pyogenes, α-гемолиз характерен для пневмококков и представителей группы viridans. Отсутствие видимой зоны разрушения эритроцитов обозначают как γ-гемолиз, то есть негемолитический фенотип. Однако гемолитическая активность не является самостоятельным видовым критерием и должна оцениваться вместе с морфологией колоний, окраской по Граму, каталазной пробой, антигенными и биохимическими тестами.
| Тип реакции | Изменения на кровяном агаре | Механизм | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| β-гемолиз | Прозрачная зона полного просветления среды вокруг колонии | Полный лизис эритроцитов под действием гемолизинов | Характерен для β-гемолитических стрептококков, включая S. pyogenes |
| α-гемолиз | Зеленоватое или буровато-зелёное окрашивание среды без полного просветления | Частичное повреждение эритроцитов и окисление гемоглобина | Типичен для S. pneumoniae и группы viridans |
| γ-гемолиз | Зона вокруг колонии отсутствует, цвет среды не изменяется | Выраженное разрушение эритроцитов не происходит | Используется как дополнительный признак при дифференциации изолятов |
| Условия оценки | Исследуют изолированные колонии после инкубации, при необходимости — в проходящем свете | Визуализация зависит от состава среды, возраста культуры и условий культивирования | Оценивать реакцию следует на свежей чистой культуре |
| Эндо-агар | Выявляет рост и ферментацию лактозы преимущественно грамотрицательными бактериями | Дифференциация основана на изменении pH и окраске колоний | Не является стандартной средой для определения гемолиза стрептококков |
| Сахарно-дрожжевой и другие специальные среды | Поддерживают рост или выявляют отдельные физиолого-биохимические свойства микроорганизмов | Не содержат эритроцитарного субстрата, необходимого для визуальной оценки гемолиза | Не заменяют кровяной агар при определении типа гемолитической реакции |
Интенсивность гемолиза может зависеть от состава среды, длительности инкубации и атмосферы культивирования, поэтому результат интерпретируют стандартизированно. Для ряда стрептококков, особенно пневмококков, зона α-гемолиза становится более заметной при инкубации в условиях повышенного содержания углекислого газа. Окончательная идентификация возбудителя требует подтверждения комплекса фенотипических, серологических или молекулярно-генетических признаков.