2) раствор КОН 20%
3) L-нафтол 1%
4) водорода пероксид 3-10% (+)
Для постановки каталазной пробы используют 3–10% раствор перекиси водорода. Каталаза — фермент, защищающий бактериальную клетку от токсичного действия пероксида водорода; она ускоряет реакцию его разложения: 2H₂O₂ → 2H₂O + O₂. Выделение молекулярного кислорода проявляется образованием характерных пузырьков газа.
Исследуемую колонию смешивают с каплей реактива на чистом предметном стекле. Появление интенсивного пузырькообразования непосредственно после контакта расценивают как положительную реакцию; отсутствие видимого газа — как отрицательную. Для анализа используют свежую чистую культуру, поскольку примесь крови, содержащей собственные каталазы эритроцитов, может привести к ложноположительному результату.
Каталазная проба имеет важное дифференциально-диагностическое значение при идентификации грамположительных кокков. В частности, она позволяет отличить каталазоположительные стафилококки и микрококки от каталазоотрицательных стрептококков и энтерококков. Результат оценивают в совокупности с морфологией, окраской по Граму, характером гемолиза и другими биохимическими признаками.
| Исследуемая группа | Каталазная реакция | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Staphylococcus spp. | Положительная, обычно быстрое интенсивное образование пузырьков | Признак, поддерживающий принадлежность к стафилококкам |
| Micrococcus spp. | Положительная | Помогает отличить микрококки от каталазоотрицательных кокков |
| Streptococcus spp. | Отрицательная | В сочетании с расположением клеток цепочками указывает на стрептококковую группу |
| Enterococcus spp. | Отрицательная | Позволяет дифференцировать энтерококки от стафилококков; возможны слабые или сомнительные реакции |
| Listeria monocytogenes | Положительная | Признак, учитываемый при идентификации мелких грамположительных палочек |
| Corynebacterium spp. и многие аэробные спорообразующие бактерии | Чаще положительная | Используется как дополнительный биохимический критерий, но не является самостоятельным видовым признаком |
Отрицательная реакция не означает отсутствия ферментативной активности во всех клетках культуры и должна оцениваться при достаточной концентрации биомассы. Слабое или позднее пузырькообразование требует повторной постановки с использованием свежей колонии и контрольного штамма. Нельзя переносить на стекло заметное количество кровяного агара, так как гемоглобин и эритроцитарные ферменты способны искажать результат. Каталазная проба является ориентировочным тестом и обычно дополняется видоспецифическими биохимическими или молекулярными методами.