2) антибиотикочувствительности
3) капсулообразованию
4) наличию плазмокоагулазы (+)
Ключевым дифференциально-диагностическим признаком Staphylococcus aureus является положительная реакция на плазмокоагулазу. Фермент стафилокоагулаза активирует протромбиноподобный механизм и вызывает превращение фибриногена в фибрин, вследствие чего исследуемая плазма свёртывается. В пробирочной методике выявляют свободную плазмокоагулазу, а в реакции на стекле может определяться связанная коагулаза — clumping factor, вызывающая агглютинацию бактерий в присутствии фибриногена.
Идентификацию проводят комплексно: учитывают грамположительные кокки, располагающиеся в виде гроздьев , каталазоположительную реакцию и результат коагулазного теста. Большинство коагулазонегативных стафилококков, прежде всего S. epidermidis и S. saprophyticus, не вызывает свёртывания плазмы, поэтому положительная плазмокоагулазная проба имеет высокую дифференциальную ценность. При сомнительном результате применяют подтверждающие тесты — определение термостабильной ДНКазы, белка A, ферментации маннита или масс-спектрометрию MALDI-TOF.
Аллергическая проба не используется для видовой идентификации стафилококков, капсулообразование не является специфичным признаком S. aureus, а антибиотикочувствительность характеризует профиль резистентности и помогает выбрать лечение. Следовательно, именно наличие плазмокоагулазы служит основным классическим критерием отнесения изолята к золотистому стафилококку.
| Признак или тест | Ожидаемый результат при S. aureus | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| Морфология и окраска по Граму | Грамположительные кокки, скопления типа гроздьев | Подтверждает принадлежность к роду Staphylococcus, но не позволяет надёжно установить вид |
| Каталазная проба | Положительная: образование пузырьков кислорода при добавлении перекиси водорода | Отличает стафилококки от каталазонегативных стрептококков и энтерококков |
| Свободная плазмокоагулаза | Положительная: образование сгустка в плазме | Основной классический видовой маркер S. aureus |
| Связанная коагулаза, или clumping factor | Агглютинация клеток на стекле в присутствии фибриногена | Позволяет быстро выявить коагулазоположительный стафилококк; при отрицательной реакции необходима пробирочная проверка |
| Термостабильная ДНКаза | Обычно положительная, зона гидролиза ДНК на питательной среде | Подтверждающий тест при спорных или слабоположительных коагулазных реакциях |
| Ферментация маннита | Часто сопровождается закислением среды и изменением её цвета | Дополнительный признак, особенно при работе с селективно-дифференциальными средами |
| Антибиотикограмма | Индивидуальный профиль чувствительности, включая возможную метициллинорезистентность | Определяет тактику терапии, но сама по себе не идентифицирует вид бактерии |
Положительный коагулазный тест не отменяет необходимости контроля чистоты культуры и оценки совокупности признаков. Для клинически значимого изолята дополнительно определяют наличие генов mecA/mecC или соответствующий фенотип устойчивости к метициллину. Современные автоматизированные системы и MALDI-TOF MS позволяют быстро подтвердить видовую принадлежность, однако биологическая основа классического ответа остаётся выявление плазмокоагулазы.