2) пробу Бюрне
3) культивирование в культуре клеток
4) реакцию термопреципитации по Асколи (+)
Положительный ответ — реакция термопреципитации по Асколи. Метод основан на выявлении термостабильного антигена Bacillus anthracis в исследуемом материале: тканевый или иной экстракт нагревают, после чего наслаивают на специфическую противосибиреязвенную сыворотку. При наличии антигена на границе слоёв образуется мутное кольцо преципитации вследствие взаимодействия растворимого антигена с антителами.
Реакция особенно применима для исследования шкур, шерсти, мяса, органов животных и других объектов, в которых возбудитель может быть повреждён или утрачен при хранении и обработке. Она позволяет обнаружить сибиреязвенный антиген даже при невозможности выделить жизнеспособную культуру, однако положительный результат не доказывает наличие живых бактерий и требует подтверждения современными методами — бактериологическим исследованием, ПЦР и оценкой комплекса эпидемиологических и клинических данных.
| Метод | Материал | Принцип | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Термопреципитация по Асколи | Шкура, шерсть, ткани, органы, мясо | Осаждение термостабильного антигена специфической сывороткой после термоэкстракции | Быстрое выявление антигена B. anthracis; не подтверждает жизнеспособность возбудителя |
| Бактериоскопия | Мазки из содержимого везикул, карбункула, крови | Окраска и микроскопия крупных грамположительных палочек, часто в цепочках | Ориентировочный результат; необходима дифференциация с другими бациллами |
| Культуральное исследование | Отделяемое поражения, кровь, биоптат | Выделение и идентификация чистой культуры | Подтверждение жизнеспособного возбудителя, выполняется в специализированной лаборатории |
| ПЦР | Клинический материал или культура | Амплификация специфических участков генома, включая маркеры хромосомы и плазмид | Быстрая высокоспецифичная молекулярная верификация |
| Серологические методы | Сыворотка крови в динамике | Выявление антител к антигенам возбудителя | Имеют вспомогательное значение, особенно при поздних сроках заболевания |
| Культивирование в культуре клеток | Клинический материал | Оценка цитопатического действия или внутриклеточного размножения | Не является стандартным методом диагностики сибирской язвы |
При подозрении на сибирскую язву забор и транспортировку материала проводят с соблюдением строгих требований биологической безопасности. Результат реакции Асколи интерпретируют только совместно с клинической картиной, эпидемиологическим анамнезом и данными других исследований. Отрицательная реакция не исключает заболевание, если антиген в образце отсутствует или его концентрация недостаточна.