2) H. influenzae
3) H. aproPHilus
4) H. Parainfluenzae
Гемолитическая активность характерна для Haemophilus parahaemolyticus. При культивировании на кровяном агаре этот микроорганизм образует прозрачную зону полного разрушения эритроцитов, то есть β-гемолиз. Именно выраженная или слабая β-гемолитическая реакция является дифференциально-диагностическим признаком, позволяющим отличать его от ряда других представителей рода Haemophilus.
Гемолиз связан с продукцией гемолитических факторов, повреждающих мембраны эритроцитов и вызывающих выход гемоглобина в питательную среду. Для выявления признака используют обогащённый кровяной агар, обычно с инкубацией при 35–37 °C в атмосфере с повышенным содержанием CO2. Интенсивность зоны просветления может зависеть от состава среды, возраста культуры и условий инкубации, поэтому результат оценивают только при наличии типичного роста и контрольных признаков.
H. influenzae, H. parainfluenzae и H. aphrophilus обычно не проявляют гемолитической активности. Для их дифференциации используют потребность в факторах роста X и V, способность к спутниковому росту около колоний Staphylococcus aureus, капнофильность и биохимический профиль. Таким образом, сочетание роста на кровяном агаре с β-гемолизом наиболее характерно именно для H. parahaemolyticus.
| Микроорганизм или диагностический признак | Гемолиз на кровяном агаре | Ключевые особенности дифференциации |
|---|---|---|
| Haemophilus parahaemolyticus | β-гемолиз, зона просветления вокруг колоний | Обычно нуждается в факторе V, фактор X не является обязательным; гемолиз — основной отличительный признак |
| Haemophilus influenzae | Как правило, отсутствует | Требует факторов X и V; возможен спутниковый рост вокруг S. aureus, который высвобождает фактор V |
| Haemophilus parainfluenzae | Отсутствует | Обычно требуется фактор V, фактор X не нужен; колонии мелкие, рост улучшается в атмосфере с CO2 |
| Haemophilus aphrophilus (актуальное название — Aggregatibacter aphrophilus) | Обычно отсутствует | Капнофильный микроорганизм группы HACEK; идентификация опирается на медленный рост и биохимические или масс-спектрометрические признаки |
| Условия постановки теста | Кровяной агар, 35–37 °C, 5–10% CO2 | Оценивают просветление среды вокруг изолированных колоний через 24–48 часов, учитывая возможный слабый гемолиз |
| Диагностическое значение | β-гемолиз поддерживает идентификацию H. parahaemolyticus | Признак не заменяет видовую идентификацию: необходимы тесты на факторы X/V, биохимический профиль, MALDI-TOF MS или молекулярные методы |
Отсутствие гемолиза у большинства других гемофильных бактерий не исключает их роста на кровяных средах, поскольку решающим может быть наличие необходимых факторов роста. Гемолитическую реакцию следует интерпретировать совместно с морфологией колоний, потребностью в X и V-факторах и результатами видовой идентификации. В клинической лаборатории особенно важно не смешивать Haemophilus parahaemolyticus с морфологически несвязанным Vibrio parahaemolyticus. аварar