2) шигелл
3) сальмонелл
4) иерсиний (+)
Иерсинии характеризуются психротрофностью — способностью сохраняться и размножаться при низких температурах, при которых рост многих сопутствующих микроорганизмов существенно замедляется. На этом свойстве основано длительное селективное, в том числе холодовое, обогащение исследуемого пищевого продукта: оно позволяет увеличить численность Yersinia enterocolitica при исходно низкой концентрации возбудителя и одновременно уменьшить влияние конкурирующей микрофлоры.
Продолжительность обогащения зависит от применяемой среды и нормативной методики. В горизонтальном методе исследования пищевых продуктов бульон ITC инкубируют около 48 часов, тогда как обогащение в бульоне PSB продолжают 3–5 суток; классические схемы холодового обогащения могут предусматривать еще более длительную экспозицию. Для сальмонелл и шигелл обычно используют более короткое накопление, поскольку их селективные среды рассчитаны на активный рост при мезофильных температурах в течение приблизительно одних суток.
| Микроорганизм | Типичный подход к накоплению | Ориентировочная продолжительность | Дифференциально-диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Yersinia enterocolitica | Селективное обогащение в PSB или ITC, при необходимости холодовое накопление | 48 часов в ITC; 3–5 суток в PSB; в классических схемах возможно дольше | Используется психротрофность иерсиний и их способность переживать длительную инкубацию |
| Yersinia pseudotuberculosis | Холодовое накопление с последующим высевом на селективные плотные среды | Несколько суток и более в зависимости от методики | Длительное накопление повышает вероятность обнаружения небольшого количества клеток |
| Salmonella spp. | Неселективное предобогащение с последующим селективным накоплением | Обычно около 18–24 часов на каждом основном этапе | Рост стимулируют при мезофильной температуре; многосуточное холодовое накопление обычно не требуется |
| Shigella spp. | Кратковременное обогащение с быстрым высевом на дифференциально-селективные среды | Как правило, около 18–24 часов | Возбудитель чувствителен к неблагоприятным условиям, поэтому неоправданно длительная инкубация может снижать выделяемость |
| Proteus spp. | Прямой посев или непродолжительное накопление в зависимости от объекта исследования | Обычно 18–24 часа | Характерны выраженная уреазная активность и роение на неселективных плотных средах |
| Сопутствующая микрофлора | Подавляется селективными компонентами и температурным режимом | Зависит от выбранной схемы исследования | Снижение конкурентного роста облегчает последующее выделение типичных колоний иерсиний |
После обогащения материал высевают на селективно-дифференциальные плотные среды, например CIN-агар, и отбирают подозрительные колонии для биохимической, серологической или молекулярно-генетической идентификации. Одна только продолжительная инкубация не подтверждает наличие патогенных иерсиний, поскольку из пищевых продуктов могут выделяться непатогенные представители рода. Диагностическая надежность обеспечивается сочетанием накопления, культуральных признаков и подтверждающих тестов. Следовательно, наиболее длительный этап жидкого селективного обогащения обоснован именно при поиске иерсиний.