2) метафазы I
3) профазы I (+)
4) анафазы I
Ооциты, предназначенные для программы IVM (in vitro maturation — созревание in vitro), получают из малых антральных фолликулов до завершения их овариального созревания. Их характерный ядерный статус — стадия зародышевого пузырька (germinal vesicle, GV), соответствующая профазе I мейоза, точнее длительной остановке в диктиатной стадии. При этом ядерная оболочка сохранена, а первое полярное тельце еще не сформировано.
В условиях культуры происходит возобновление мейотического созревания: сначала распадается ядерная оболочка (GVBD), затем ооцит проходит метафазу I, анафазу I и телофазу I с образованием первого полярного тельца, после чего достигает метафазы II. Поэтому стадии метафазы, анафазы и телофазы I описывают последующие этапы maturation, а не исходное состояние большинства ооцитов, отобранных для IVM. Признаками успешного созревания in vitro служат экструзия первого полярного тельца и формирование метафазной пластинки метафазы II.
| Стадия мейоза | Основной морфологический признак | Состояние полярных телец | Значение для IVM |
|---|---|---|---|
| Профаза I, стадия GV | Сохранена ядерная оболочка, визуализируется зародышевый пузырек | Отсутствуют | Исходная стадия незрелого ооцита, получаемого для культивирования |
| GVBD | Распад ядерной оболочки, возобновление мейотического деления | Отсутствуют | Ранний признак начала созревания in vitro |
| Метафаза I | Хромосомы выстроены на экваторе веретена деления | Первое полярное тельце еще не выделилось | Промежуточный этап созревания |
| Анафаза I | Гомологичные хромосомы расходятся к противоположным полюсам | Обычно отсутствуют | Фаза редукционного деления перед образованием первого полярного тельца |
| Телофаза I | Завершается первое мейотическое деление, формируются два гаплоидных ядра | Начинается или завершается экструзия первого полярного тельца | Переход к метафазе II |
| Метафаза II | Хромосомы расположены на экваторе второго мейотического веретена | Первое полярное тельце присутствует | Зрелый ооцит, пригодный для оплодотворения |
Таким образом, правильная классификация исходного ооцита для IVM определяется не фактом последующего культивирования, а его незрелым ядерным состоянием в момент получения. Профаза I обеспечивает длительную физиологическую остановку ооцита в фолликуле до возобновления мейоза. Оценка ядерной стадии дополняется анализом состояния кумулюса, однако окончательным морфологическим критерием зрелости считается появление первого полярного тельца и достижение метафазы II.