2) по техническим причинам не удалось выполнить полный анализ хромосом, эмбрион может быть перенесен как не исследованный
3) в ходе исследования у эмбриона был выявлен мозаицизм
4) эмбрион гарантированно состоит только из эуплоидных клеток
Обозначение nuc ish указывает на исследование ядер методом флуоресцентной гибридизации in situ (FISH), а запись (D21S65,D21S64)×3 означает обнаружение по три сигнала для двух локусов, расположенных на хромосоме 21. Такая картина соответствует наличию трёх копий исследуемого хромосомного материала и расценивается как трисомия 21 в проанализированных клетках. Поэтому верен вариант 1: результат свидетельствует о патологии исследованных клеток, а не о неудаче исследования.
FISH является таргетным методом: он оценивает только выбранные хромосомные участки, поэтому сам по себе не заменяет полного анализа всех хромосом. Однако информативное выявление трёх сигналов по двум независимым маркерам 21-й хромосомы не означает техническую невозможность диагностики. Мозаицизм устанавливают только при обнаружении в образце клеточных линий с различным числом сигналов, например сочетания ядер с двумя и тремя сигналами; единичная картина ×3 этого не доказывает.
Результат ПГТ относится прежде всего к исследованным клеткам биоптата трофэктодермы. Он не даёт оснований считать эмбрион полностью эуплоидным и не позволяет автоматически экстраполировать выявленный набор на каждую клетку эмбриона. При интерпретации учитывают метод исследования, число проанализированных ядер, качество сигналов и возможность несоответствия между биоптатом и внутренней клеточной массой.
| Результат FISH | Диагностический смысл | Интерпретация |
|---|---|---|
| (D21S65,D21S64)×2 | По два сигнала каждого маркера | Нормальное дисомное состояние по исследуемым локусам 21-й хромосомы |
| (D21S65,D21S64)×3 | По три сигнала каждого маркера | Трисомия 21 либо увеличение копий исследуемого материала в проанализированных клетках |
| Часть ядер ×2, часть ×3 | Сосуществование клеток с различным числом копий | Признак мозаицизма; требует оценки доли аномальных клеток и качества образца |
| Отсутствие сигналов или слабые, неразделимые сигналы | Невозможность надёжно подсчитать копии | Неинформативный или технически сомнительный результат, а не подтверждённая эуплоидия |
| Нормальные сигналы по 21-й хромосоме | Исследуемые локусы представлены в ожидаемом числе | Исключает аномалию только по данному таргету, но не все возможные хромосомные нарушения |
| Панель FISH по нескольким хромосомам | Проверка ограниченного набора хромосом | Более широкий, но всё ещё таргетный анализ; не равен полному кариотипированию |
| ПГТ-A методом NGS или сравнительной геномной гибридизации | Оценка числа копий по всему хромосомному набору | Позволяет выявлять более широкий спектр анеуплоидий, но также интерпретируется с учётом мозаицизма и ограничений биопсии |
Три сигнала по двум локусам 21-й хромосомы являются молекулярно-цитогенетическим признаком её количественного увеличения в исследованных клетках. Для окончательной клинической интерпретации учитываются границы метода и вероятность мозаицизма, особенно при анализе небольшого числа клеток. ПГТ не гарантирует генетическую норму каждой клетки эмбриона и не заменяет пренатальную диагностику при наступлении беременности. Решение о репродуктивной тактике принимают с учётом полного протокола исследования и генетического консультирования.