2) ионообменной
3) распределительной
4) адсорбционной (+)
Тонкослойная хроматография на стандартных пластинках основана преимущественно на адсорбции веществ поверхностью неподвижной фазы. В качестве сорбента обычно используют силикагель, реже оксид алюминия или другие полярные материалы, нанесённые тонким слоем на пластинку. Растворитель перемещается по слою за счёт капиллярных сил и служит подвижной фазой, а компоненты анализируемой смеси с различной силой удерживаются на поверхности сорбента.
Чем сильнее вещество взаимодействует с сорбентом посредством водородных связей, диполь-дипольных и других межмолекулярных взаимодействий, тем медленнее оно перемещается и тем меньше его коэффициент удерживания Rf. Вещества, слабее адсорбирующиеся на неподвижной фазе, продвигаются дальше вместе с элюентом. Именно различия в адсорбции и десорбции обеспечивают разделение компонентов смеси, поэтому данный метод относят к адсорбционной хроматографии.
| Вид метода | Неподвижная фаза | Основной механизм разделения | Характерный признак |
|---|---|---|---|
| Тонкослойная адсорбционная хроматография | Силикагель, оксид алюминия | Различная адсорбция компонентов на поверхности сорбента | Разные значения Rf и различное расстояние миграции пятен |
| Распределительная хроматография | Жидкая неподвижная фаза, удерживаемая на носителе | Распределение вещества между двумя несмешивающимися фазами | Разделение определяется коэффициентом распределения, а не только поверхностным удерживанием |
| Ионообменная хроматография | Ионообменная смола с фиксированными зарядами | Обратимый обмен ионов анализируемого вещества с противоионами смолы | Селективность зависит от заряда, pH и ионной силы элюента |
| Эксклюзионная хроматография | Пористый гель | Разделение по размеру и гидродинамическому объёму молекул | Крупные молекулы элюируются раньше мелких, проникающих в поры |
| Аффинная хроматография | Носитель с иммобилизованным лигандом | Специфическое взаимодействие лиганда с молекулой-мишенью | Высокая селективность, основанная на принципе лиганд—рецептор |
| Осадительный метод | Реакционная среда, образующая осадок | Переход вещества в малорастворимое соединение | Формирование осадка, а не последовательная миграция компонентов в сорбенте |
Для идентификации соединений в ТСХ сопоставляют положение и окраску пятен со стандартными образцами, а также рассчитывают значение Rf. Проявление осуществляют визуально, в ультрафиолетовом свете или с помощью специфических реагентов. Метод широко применяют для контроля подлинности, чистоты и состава лекарственных средств, лекарственного растительного сырья и извлечений. Несмотря на возможность смешанного механизма в специально модифицированных системах, классическая ТСХ на силикагеле в фармацевтическом анализе рассматривается как адсорбционная хроматография.