2) мононуклеаров (+)
3) плазмы
4) тромбоцитов
Экстракорпоральный фотоферез начинается с лейкафереза — разделения крови в аппарате для афереза с выделением мононуклеарной фракции. В нее преимущественно входят лимфоциты и моноциты, имеющие одно несегментированное ядро. Именно эта клеточная фракция подвергается последующей фотохимической обработке, поэтому ее получение является обязательным этапом процедуры.
Выделенные мононуклеары смешивают с 8-метоксипсораленом и подвергают воздействию ультрафиолетового излучения спектра UVA. После активации псоралена в клетках возникают сшивки ДНК, что приводит к апоптозу части обработанных лимфоцитов после их возвращения пациенту и формирует иммуномодулирующий эффект. Эритроциты, тромбоциты и большая часть плазмы не являются целевой фракцией фотофереза и, как правило, возвращаются в кровоток.
| Компонент или этап | Основное содержание | Роль в фотоферезе |
|---|---|---|
| Мононуклеарная фракция | Лимфоциты и моноциты | Целевая клеточная фракция, выделяемая при лейкаферезе и подвергаемая фотоактивации |
| Лимфоциты | T-, B- и NK-клетки | Основные иммунокомпетентные клетки, на которые направлено фотохимическое воздействие |
| Моноциты | Клетки моноцитарно-макрофагальной системы | Участвуют в последующей иммунной регуляции и формировании толерогенного ответа |
| Эритроциты | Безъядерные клетки, содержащие гемоглобин | Не являются мишенью; преимущественно возвращаются пациенту |
| Тромбоциты | Безъядерные фрагменты мегакариоцитов | Не подвергаются целевой фототерапии; их потеря минимизируется для профилактики тромбоцитопении |
| Плазма | Жидкая часть крови с белками и электролитами | Служит средой циркуляции, но не является клеточной мишенью процедуры |
| 8-метоксипсорален и UVA | Фотосенсибилизатор и ультрафиолетовое излучение | Вызывают повреждение ДНК выделенных мононуклеаров и запускают иммуномодулирующий эффект |
Фотоферез относится к клеточной иммуномодулирующей терапии, а не к обычной плазмообменной процедуре. Его применяют, в частности, при кожной T-клеточной лимфоме, стероидорезистентной реакции трансплантат против хозяина и некоторых состояниях после трансплантации органов. Эффективность связана не только с удалением патологически активных клеток, но и с последующим формированием более толерантного иммунного ответа. Поэтому получение мононуклеаров является принципиальным этапом, определяющим возможность дальнейшей фотообработки клеточного материала.