2) выявления потенциальных мишеней для таргетной терапии
3) прогнозирования наличия определенных генетических аберраций
4) диагностики морфологического варианта ОЛ
Знание типичных аберраций иммунного фенотипа необходимо прежде всего для выявления минимальной остаточной болезни (МРБ). Опухолевые клетки часто образуют патологические сочетания антигенов, нехарактерные для нормальных клеток соответствующей линии: наблюдаются асинхронная экспрессия маркеров, утрата или ослабление нормальных антигенов, экспрессия маркеров другой линии и необычная интенсивность окрашивания. Такой лейкоз-ассоциированный иммунный фенотип (LAIP) позволяет отличать небольшую популяцию опухолевых клеток от нормального кроветворения после лечения.
Для оценки МРБ применяют многопараметрическую проточную цитометрию, сопоставляя иммунophenотип опухоли при диагностике с профилем клеток в контрольном образце. Даже при отсутствии морфологических признаков заболевания патологическую популяцию можно обнаружить с чувствительностью, обычно достигающей 10−4–10−5, а при использовании современных стандартизированных панелей — выше. Поэтому необходимо знать характерные аберрации для конкретного типа гемобластоза и учитывать возможную изменчивость фенотипа под влиянием терапии.
Иммунophenотипирование также помогает установить принадлежность опухоли к миелоидной, B-клеточной, T-клеточной или плазмоклеточной линии и может косвенно указывать на отдельные генетические изменения или наличие терапевтических мишеней. Однако эти задачи являются дополнительными: определение МРБ непосредственно основано на распознавании уникального или патологического антигенного профиля опухолевых клеток среди нормальных клеток-предшественников.
| Опухолевое заболевание | Типичные иммунophenотипические признаки | Принцип использования для МРБ |
|---|---|---|
| B-лимфобластный лейкоз/лимфома | CD19, CD10, CD34, TdT; возможны аберрантная экспрессия CD13/CD33, изменённая интенсивность CD45 или CD20 | Выявление патологического сочетания B-клеточных и миелоидных либо незрелых маркеров |
| T-лимфобластный лейкоз/лимфома | cyCD3, CD7, CD2, CD5, TdT; возможны слабая или асинхронная экспрессия CD3, CD1a, CD4 и CD8 | Отличие опухолевых T-клеток от нормальных тимических и периферических T-лимфоцитов |
| Острый миелоидный лейкоз | CD34, CD117, CD13, CD33, MPO; возможны аберрантные CD7, CD19, CD56 или отсутствие ожидаемых миелоидных антигенов | Поиск лейкозной популяции по сочетанию миелоидных и несоответствующих линии маркеров |
| Хронический лимфолейкоз/В-клеточная лимфома | Клональные B-клетки CD19+/CD5+/CD23+, слабая экспрессия CD20 и иммуноглобулинов, рестрикция κ или λ | Подтверждение клональности и количественный контроль остаточной опухолевой популяции |
| Плазмоклеточные неоплазии | CD38яркий, CD138, цитоплазматические иммуноглобулины; часто CD56+, CD19−, CD45 сниженный или отрицательный | Разграничение патологических плазматических клеток и нормальных плазмоцитов с последующим подсчётом МРБ |
| Миелодиспластические и миелопролиферативные неоплазии | Дисбаланс созревания, аномальная интенсивность CD13, CD16, CD33, CD34, CD117, HLA-DR, CD56 | Оценка патологического созревания и сохранение исходного фенотипического отпечатка опухоли |
| Основные методы подтверждения МРБ | Многопараметрическая проточная цитометрия, количественная ПЦР, цифровая ПЦР, NGS | Иммунofenотипический подход особенно полезен при отсутствии доступного молекулярного маркера или при необходимости быстрого количественного контроля |
Результат исследования МРБ имеет важное прогностическое значение: сохранение или повторное появление опухолевой популяции связано с повышенным риском рецидива. Для достоверной оценки используют исходный диагностический образец, стандартизированные панели антител и контроль качества материала. Иммунofenотипические данные интерпретируют совместно с морфологией, цитогенетикой и молекулярными исследованиями. Таким образом, характерные аберрации являются основой распознавания остаточных опухолевых клеток после лечения.