2) реактивом Самсона (+)
3) раствором эозина 1%
4) раствором гематоксилина
Для подсчёта цитоза нативного ликвора применяют реактив Самсона. Это слабокислый окрашивающий состав, содержащий генцианвиолет, который интенсивно окрашивает ядра лейкоцитов и делает их хорошо различимыми в счётной камере. Кислотный компонент вызывает гемолиз эритроцитов, благодаря чему уменьшается оптическое и количественное влияние примеси крови на подсчёт клеточных элементов.
Окрашенный реактивом ликвор помещают в камеру Фукса—Розенталя или другую стандартизованную счётную камеру и определяют число клеток в заданном объёме. Результат выражают в клетках/мкл или ×106/л; при интерпретации учитывают возраст пациента, качество образца и возможную травматическую примесь крови. Метод позволяет оценить общий цитоз, тогда как клеточный состав и преобладающий тип лейкоцитов уточняют после цитологического исследования осадка или препарата.
Другие перечисленные красители не являются оптимальными для рутинного подсчёта клеток в нативной спинномозговой жидкости. Метиленовый синий и гематоксилин могут окрашивать клеточные структуры, но требуют иных условий фиксации или не обеспечивают необходимого сочетания ядерной контрастности и лизиса эритроцитов. Эозин преимущественно выявляет цитоплазматические и белковые компоненты и поэтому не используется как основной реагент для определения цитоза.
| Метод или реагент | Основной объект выявления | Принцип | Практическое значение |
|---|---|---|---|
| Реактив Самсона | Лейкоциты и другие ядерные элементы нативного ликвора | Генцианвиолет окрашивает ядра, кислотный компонент гемолизирует эритроциты | Стандартный подход к количественному подсчёту цитоза в счётной камере |
| Камера Фукса—Розенталя | Клетки в определённом объёме жидкости | Подсчёт элементов в градуированной сетке с последующим пересчётом на 1 мкл или 1 л | Получение количественного показателя цитоза при низкой клеточности ликвора |
| Метиленовый синий | Отдельные клеточные структуры, преимущественно ядра | Основной краситель с ограниченной специфичностью и без оптимального гемолиза эритроцитов | Не является стандартным реагентом для рутинного подсчёта цитоза ликвора |
| Эозин | Цитоплазматические и белковые компоненты | Кислый краситель, формирующий преимущественно цитоплазматическую окраску | Самостоятельное применение для подсчёта клеток нативного ликвора неинформативно |
| Гематоксилин | Ядра фиксированных клеток | Окрашивание хроматина обычно после фиксации и подготовки препарата | Используется в морфологической цитологии, но не как основной реагент для нативного цитоза |
| Цитоспин с последующей окраской | Морфология и дифференциальный состав клеток | Концентрация клеток на ограниченной площади и окрашивание по Романовскому—Гимзе или аналогичной методике | Применяется для дифференцировки лимфоцитов, нейтрофилов, моноцитов и атипичных клеток |
| Проточная цитометрия | Иммунофенотип клеточной популяции | Регистрация клеток по светорассеянию и экспрессии антигенов | Дополнительный метод при подозрении на лимфопролиферативный процесс или опухолевое поражение ЦНС |
Цитоз оценивают вместе с белком, глюкозой, лактатом и клинической картиной заболевания. Лимфоцитарный плеоцитоз чаще встречается при вирусных, туберкулёзных и некоторых аутоиммунных процессах, а нейтрофильный — при бактериальном воспалении, хотя на ранних стадиях возможны переходные варианты. Примесь крови при травматичной пункции может искусственно повышать число клеток, поэтому результат сопоставляют с количеством эритроцитов и внешним видом ликвора. Реактив Самсона обеспечивает наиболее удобную визуализацию ядерных элементов именно в нативном образце и потому является препаратом выбора для первичного количественного подсчёта.