2) анатоксин
3) бактериальный диагностикум
4) эритроцитарный диагностикум (+)
Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации основана на использовании эритроцитов как инертного носителя. На их поверхности предварительно фиксируют известный антиген или антитело, формируя эритроцитарный диагностикум. При добавлении исследуемого материала специфические иммуноглобулины или антиген связываются с сенсибилизированными эритроцитами и соединяют их в пространственную решётку, что приводит к видимой агглютинации.
В наиболее распространённом варианте для выявления антител в сыворотке пациента применяют эритроциты, нагруженные бактериальным антигеном. Положительная реакция проявляется равномерным рыхлым осадком или вуалью на дне лунки, а неагглютинированные клетки образуют компактную пуговку . При обратном варианте на эритроциты адсорбируют специфические антитела и выявляют растворимый антиген. Поэтому ключевым компонентом постановки является именно эритроцитарный диагностикум.
Комплемент для непрямой гемагглютинации не требуется, поскольку реакция основана на прямом взаимодействии антигена и антитела, а не на активации системы комплемента. Анатоксин может выступать антигенным материалом в отдельных иммунологических исследованиях, но не является универсальным реагентом данной реакции. Бактериальный диагностикум может использоваться в других вариантах агглютинации, однако при РНГА антиген или антитело должны быть связаны с эритроцитарным носителем.
| Компонент или признак | Характеристика в РНГА |
|---|---|
| Носитель | Эритроциты, обычно обработанные для адсорбции антигена или антитела |
| Основной реагент | Эритроцитарный диагностикум с известной иммунологической специфичностью |
| Выявление антител | Используют эритроциты, сенсибилизированные соответствующим микробным антигеном |
| Выявление антигена | Используют эритроциты, на поверхности которых фиксированы специфические антитела |
| Положительный результат | Равномерное распределение агглютинированных эритроцитов по дну лунки в виде вуали или широкого осадка |
| Отрицательный результат | Компактный округлый осадок неагглютинированных эритроцитов |
| Количественная оценка | Титр определяют по наибольшему разведению сыворотки, сохраняющему специфическую агглютинацию |
Для исключения неспецифической агглютинации обязательно ставят контроль сыворотки и контроль эритроцитарного диагностикума. Диагностическое значение имеет не только однократный титр, но и его динамика в парных сыворотках. Четырёхкратное и более нарастание титра при исследовании сывороток, взятых в разные сроки, поддерживает наличие текущего инфекционного процесса. Результат интерпретируют с учётом клинических данных, сроков заболевания и возможных фоновых антител.