2) трепанобиопсия подвздошной кости
3) мазок периферической крови
4) цитохимический метод (+)
Цитохимическое исследование имеет ключевое значение для определения варианта острого лейкоза, поскольку выявляет ферментативные и химические особенности бластных клеток. Наиболее информативна реакция на миелопероксидазу: её положительный результат характерен для миелоидных бластов и поддерживает диагноз острого миелоидного лейкоза. Реакции с неспецифической эстеразой помогают распознать моноцитарную дифференцировку, периодическая кислотная реакция Шиффа (PAS) может иметь диагностическое значение при лимфобластных формах, а сочетание реакций позволяет дифференцировать отдельные морфологические варианты.
Пунктат костного мозга необходим прежде всего для подтверждения наличия патологической популяции бластов и оценки их количества; диагностически значимым обычно является содержание бластов не менее 20%, за исключением отдельных генетически определённых форм. Однако сама морфология бластов нередко недостаточна для установления клеточной линии. Трепанобиопсия оценивает архитектонику костного мозга, степень инфильтрации и фиброз, а исследование периферической крови может не отражать истинную распространённость процесса. В современной диагностике цитохимические реакции дополняются проточной цитометрией, цитогенетическими и молекулярно-генетическими методами, но в традиционной морфоцитохимической классификации именно они имеют наибольшее значение для определения варианта острого лейкоза.
| Метод | Основная диагностическая задача | Типичные признаки | Ограничения |
|---|---|---|---|
| Цитохимическое окрашивание | Определение направления дифференцировки бластов | Миелопероксидаза и Sudan black B — миелоидная линия; неспецифическая эстераза — моноцитарная; PAS — преимущественно лимфобластные изменения | Не всегда позволяет точно установить вариант; результаты требуют сопоставления с иммунophenотипом |
| Пункция костного мозга | Подтверждение острого лейкоза и количественная оценка бластов | Гиперклеточный костный мозг, замещение нормального кроветворения бластными клетками, увеличение их доли | Может быть недостаточной для определения линии без дополнительных исследований |
| Исследование периферической крови | Первичный скрининг и оценка выраженности цитопений | Бласты, анемия, тромбоцитопения, нейтропения или лейкоцитоз | Бласты могут отсутствовать в крови при алейкемическом варианте |
| Трепанобиопсия подвздошной кости | Оценка структуры костного мозга и характера инфильтрации | Диффузное или очаговое замещение кроветворной ткани, миелофиброз, некроз | Менее удобна для детальной цитохимической характеристики отдельных клеток |
| Иммунофенотипирование методом проточной цитометрии | Подтверждение принадлежности бластов к миелоидной, В- или Т-лимфоидной линии | CD13, CD33, MPO для миелоидной линии; CD19, CD79a, CD10, TdT для В-линии; CD3, CD7, TdT для Т-линии | Требует качественного клеточного материала и стандартизированной панели антител |
| Цитогенетическое и молекулярное исследование | Уточнение генетически определённой формы и прогноза | Выявление транслокаций, мутаций, амплификаций и других хромосомных нарушений | Результат не всегда доступен немедленно; не заменяет морфологическую и иммунологическую оценку |
Цитохимическая характеристика особенно важна при разграничении миелоидных и лимфобластных форм, а также при подозрении на моноцитарную или смешанную дифференцировку. Отрицательная реакция не исключает острый лейкоз и должна оцениваться с учётом качества материала и чувствительности метода. Окончательная классификация по современным стандартам основывается на совокупности морфологических, иммунологических и генетических данных. Полученные результаты имеют значение не только для номенклатуры заболевания, но и для выбора протокола лечения и прогностической оценки.