2) CD8+
3) CD20+
4) CD4+
NK-клетки (natural killer, естественные киллеры) относятся к лимфоцитам врождённого иммунитета и обладают спонтанной цитотоксичностью в отношении инфицированных и опухолевых клеток. В проточной цитометрии в качестве характерного маркера NK-клеток используют экспрессию CD16 (FcγRIIIa) — рецептора к Fc-фрагменту IgG, обеспечивающего антителозависимую клеточную цитотоксичность. Поэтому в рамках данного теста правильным является вариант CD16+.
Для достоверного подсчёта обычно применяют не изолированное определение CD16, а комбинацию маркеров: лимфоцитарный гейт CD45+, отсутствие CD3 и наличие CD56 и/или CD16. Наиболее многочисленная популяция периферической крови имеет фенотип CD3−CD16+CD56dim и выраженную цитотоксическую активность; CD56brightCD16−/dim-клетки преимущественно продуцируют цитокины. Количество NK-клеток может выражаться как процент среди лимфоцитов или как абсолютное число, рассчитанное с учётом общего числа лимфоцитов.
Экспрессия CD8 не является специфичной для NK-клеток, поскольку этот маркер характерен прежде всего для цитотоксических T-лимфоцитов, а также встречается у части NK-клеток. CD20 определяет B-лимфоциты, а CD4 — преимущественно T-хелперы. Таким образом, CD16+ служит ключевым ориентиром при идентификации NK-клеток, но интерпретировать его следует в составе панели с CD3 и CD56.
| Клеточная популяция | Основной иммунофенотип | Диагностическое значение |
|---|---|---|
| NK-клетки периферической крови | CD3−CD16+CD56+ | Основная популяция естественных киллеров; цитотоксичность и антителозависимая клеточная цитотоксичность |
| Цитотоксические T-лимфоциты | CD3+CD8+ | Антиген-специфический клеточный иммунитет через T-клеточный рецептор; не относятся к NK-клеткам |
| T-хелперы | CD3+CD4+ | Регуляция иммунного ответа, помощь B-клеткам и активация эффекторных клеток |
| B-лимфоциты | CD19+CD20+ | Гуморальный иммунитет и дифференцировка в антителопродуцирующие клетки |
| NK-клетки CD56dim | CD3−CD56dimCD16+ | Преимущественно цитотоксическая субпопуляция, преобладающая в крови |
| NK-клетки CD56bright | CD3−CD56brightCD16−/dim | Преимущественно продуценты IFN-γ и других цитокинов; чаще представлены в тканях |
| NKT-подобные клетки | CD3+CD56+ | Экспрессируют одновременно T-клеточный и NK-ассоциированный маркеры и должны отличаться от классических CD3− NK-клеток |
Определение числа NK-клеток относится к иммунному фенотипированию методом многоцветной проточной цитометрии. Изменение их количества оценивают с учётом возраста, клинического состояния, инфекций, иммунодефицитов и проводимой терапии. Для оценки функции NK-клеток дополнительно исследуют цитотоксическую активность и продукцию цитокинов, поскольку нормальное количество не всегда означает сохранённую функциональную полноценность.