2) изменением антигенных детерминант на исследуемых эритроцитах
3) несоблюдением времени проведения реакции (+)
4) малым количеством антигенных детерминант на исследуемых эритроцитах
Техническая ошибка при определении группы крови может возникнуть при несоблюдении времени постановки и учета реакции агглютинации. При слишком ранней оценке слабая агглютинация, особенно при низкой экспрессии антигенов системы ABO, может остаться незамеченной, что создает риск ложноотрицательного результата. При чрезмерно позднем учете возможно высыхание капли, образование неспецифических агрегатов и ошибочная трактовка реакции как положительной.
Результат определения группы крови оценивают строго в сроки, установленные методикой и инструкцией к применяемым реагентам. Необходимо учитывать время контакта эритроцитов с цоликлонами или стандартными сыворотками, температуру, соотношение объемов, качество перемешивания и характер агглютинатов. Поэтому несоблюдение времени проведения реакции относится именно к преаналитическим и аналитическим техническим ошибкам.
Утрата, изменение или низкая плотность антигенных детерминант на эритроцитах обычно характеризуют биологические особенности образца либо серологические варианты, например слабые подгруппы антигена A, и могут затруднять интерпретацию. Они не являются непосредственным следствием нарушения регламента выполнения реакции, хотя требуют применения дополнительных методов подтверждения.
| Фактор | Механизм ошибки | Возможный результат | Профилактика |
|---|---|---|---|
| Несоблюдение времени реакции | Раннее считывание не позволяет сформироваться слабым агглютинатам; позднее считывание сопровождается высыханием капли | Ложноотрицательная или ложноположительная оценка | Строго соблюдать время, указанное в методике и инструкции к реагенту |
| Неправильное соотношение реагента и эритроцитов | Изменяется концентрация антител и клеток в реакционной смеси | Ослабление или искажение агглютинации | Использовать калиброванные пипетки и регламентированные объемы |
| Недостаточное перемешивание | Эритроциты контактируют с антителами неравномерно | Пропуск мелких или слабых агглютинатов | Осторожно и равномерно перемешивать содержимое постановки |
| Нарушение температурного режима | Меняется скорость и выраженность иммунной реакции | Ослабление реакции или появление неспецифической агглютинации | Проводить исследование при температуре, предусмотренной методикой |
| Низкая экспрессия антигена | На мембране эритроцита находится недостаточное количество антигенных детерминант | Слабая или сомнительная агглютинация | Проводить подтверждающие исследования и учитывать возможные подгруппы ABO |
| Изменение или утрата антигенов | Биологическая модификация антигенного профиля клеток при отдельных заболеваниях или состояниях | Несоответствие прямого и обратного определения группы | Сопоставлять результаты прямой и обратной реакций, при необходимости повторять анализ |
| Загрязнение посуды или реагентов | Посторонние вещества нарушают специфическое взаимодействие антиген–антитело | Неспецифическая агглютинация или отсутствие реакции | Использовать чистую маркированную посуду и контролировать сроки годности реагентов |
Контроль времени особенно важен при слабовыраженной агглютинации, когда визуальная оценка зависит от соблюдения всех этапов методики. При сомнительном результате исследование повторяют с контрольными постановками и сопоставляют прямое определение антигенов с обратным определением естественных антител. Несоответствие результатов требует исключения технической ошибки, слабых вариантов антигенов и других причин расхождения. Окончательное заключение не следует выдавать до устранения выявленного несоответствия.