2) клинических данных
3) иммунофенотипической и цитохимической характеристике бластных клеток (+)
4) морфологических особенностях бластных клеток
Вариант острого лейкоза определяется прежде всего принадлежностью бластных клеток к миелоидной, В-лимфоидной, Т-лимфоидной или смешанной линии. Иммунофенотипирование методом проточной цитометрии выявляет экспрессию линейно- и стадийно-специфических антигенов, а цитохимические реакции подтверждают функциональные признаки клеток, например активность миелопероксидазы или неспецифической эстеразы. Поэтому именно комплексная характеристика бластов позволяет дифференцировать острый миелоидный лейкоз, острый лимфобластный лейкоз и лейкозы смешанного фенотипа.
Клинические проявления и изменения общего анализа крови — анемия, тромбоцитопения, нейтропения, геморрагический и инфекционный синдромы — у разных вариантов острого лейкоза во многом сходны и не определяют клеточную линию. Морфология бластов также имеет ориентировочное значение: наличие азурофильной зернистости или палочек Ауэра поддерживает миелоидную направленность, но не заменяет иммунологического исследования. Степень угнетения нормальных ростков кроветворения отражает распространённость патологического процесса, однако не является критерием его варианта.
| Диагностический вариант | Основные иммунологические признаки | Цитохимические и дополнительные ориентиры |
|---|---|---|
| Острый миелоидный лейкоз | Экспрессия CD13, CD33, CD117, часто HLA-DR; возможна аберрантная экспрессия других антигенов | Миелопероксидаза и/или Sudan Black B положительны; при гранулоцитарной дифференцировке возможны палочки Ауэра |
| Острый лимфобластный лейкоз В-линии | CD19, CD79a, CD22, часто CD10, TdT и CD34; оценивается цитоплазматический иммуноглобулин | Миелопероксидаза обычно отрицательна; PAS-реакция может иметь блочный характер |
| Острый лимфобластный лейкоз Т-линии | Наиболее специфичен цитоплазматический или поверхностный CD3; часто выявляются CD7, CD2, CD5 и TdT | Миелопероксидаза отрицательна; цитохимия имеет вспомогательное значение |
| Моноцитарная дифференцировка | CD64, CD14, CD11c, CD36 и другие моноцитарные маркеры в различном сочетании | Характерна активность неспецифической эстеразы, подавляемая фторидом; возможна смешанная гранулоцитарно-моноцитарная картина |
| Острый лейкоз смешанного фенотипа | Одновременное наличие убедительных признаков двух линий: миелоидной, В- или Т-лимфоидной | Диагноз устанавливают только при выполнении критериев линейной принадлежности, а не по единичному слабому маркеру |
| Мегакариобластный вариант | Мегакариоцитарные антигены CD41, CD61, CD42b; возможна выраженная незрелость клеток | Миелопероксидаза обычно отрицательна; необходима иммунологическая верификация для исключения других вариантов |
| Эритроидная дифференцировка | CD71, гликофорин A и другие маркеры эритроидного ряда на соответствующих этапах созревания | Могут выявляться PAS-положительные гранулы; интерпретация проводится вместе с морфологией и генетическими данными |
Современная верификация острого лейкоза является интегрированной и включает также цитогенетические и молекулярно-генетические исследования, поскольку отдельные генетические аномалии способны определять самостоятельную нозологическую категорию. Иммунофенотипирование необходимо не только для первичной классификации, но и для выявления минимальной остаточной болезни. Цитохимические реакции сохраняют значение как быстрый подтверждающий метод, особенно при разграничении миелоидной и лимфоидной направленности.