2) метиленовым синим
3) азур-эозином по Лейшману
4) по Цилю — Нильсону (+)
Правильный ответ — окраска по Цилю—Нильсену. Метод применяется для выявления кислотоустойчивых микобактерий, прежде всего Mycobacterium tuberculosis, в мазках мокроты. Их клеточная стенка содержит большое количество липидов, включая миколовые кислоты, поэтому после обработки карболовым фуксином они прочно удерживают краситель и не обесцвечиваются кислотно-спиртовым раствором.
При классической методике мазок окрашивают фуксином с подогреванием, затем обесцвечивают кислотой и докрашивают метиленовым синим. Кислотоустойчивые бактерии выявляются как тонкие красные или малиново-красные палочки на синем фоне. Метиленовый синий, азур-эозин по Лейшману и берлинская лазурь не обладают необходимой специфической комбинацией этапов и предназначены для других диагностических задач: общей морфологической оценки клеток, гематологических исследований или выявления железосодержащих пигментов.
| Метод или признак | Основное применение | Результат в отношении кислотоустойчивых бактерий |
|---|---|---|
| Окраска по Цилю—Нильсену | Микроскопическое выявление микобактерий в мокроте | Бактерии сохраняют красный цвет после кислотно-спиртового обесцвечивания |
| Кислотоустойчивость | Дифференциально-диагностический признак клеточной стенки | Обусловлена высоким содержанием миколовых кислот и липидов |
| Метиленовый синий | Контрастная окраска фона и общая оценка клеточных элементов | Не выявляет кислотоустойчивость; используется как контрастный краситель в методе Циля—Нильсена |
| Азур-эозин по Лейшману | Исследование клеток крови и некоторых элементов воспалительного экссудата | Не является стандартным методом обнаружения микобактерий в мокроте |
| Берлинская лазурь | Выявление трёхвалентного железа и гемосидерина | Для диагностики кислотоустойчивых бактерий не применяется |
| Микроскопический результат | Ориентировочное подтверждение наличия кислотоустойчивых бактерий | Красные палочки на синем фоне; видны при достаточной бактериальной нагрузке |
Положительный результат окраски по Цилю—Нильсену указывает на наличие кислотоустойчивых бактерий, но не обеспечивает видовую идентификацию и не заменяет молекулярное исследование или культуральный метод. Отрицательный мазок не исключает туберкулёзную инфекцию, особенно при низкой концентрации возбудителя в материале. Чувствительность повышают исследование нескольких образцов мокроты и применение методов обогащения. Для окончательного подтверждения M. tuberculosis используют ПЦР-тесты, посев на специализированные среды и тестирование лекарственной устойчивости.