2) окрашивание азур-эозином
3) реакцию Перлса (+)
4) окрашивание метиленовым синим
Сидерофаги — это макрофаги, содержащие гемосидерин, образующийся при внутритканевом распаде эритроцитов и гемоглобина. Для их выявления применяют реакцию Перлса, или реакцию берлинской лазури. В кислой среде ионы трёхвалентного железа, входящие в состав гемосидерина, взаимодействуют с ферроцианидом калия с образованием нерастворимого ферриферроцианида — пигмента интенсивного синего цвета.
Положительная реакция проявляется грубыми синими или сине-зелёными гранулами в цитоплазме макрофагов. Обнаружение таких клеток особенно информативно в бронхоальвеолярном лаваже и биоптатах лёгкого: сидерофаги могут указывать на хронический венозный застой при левожелудочковой недостаточности, повторные альвеолярные кровоизлияния или диффузное альвеолярное повреждение. При этом оценивают не только наличие окрашенных гранул, но и их количество, распределение и сочетание с другими морфологическими признаками.
Азур-эозин и метиленовый синий используются преимущественно для общей оценки клеточного состава и морфологии, но не обладают специфичностью к депонированному железу. Окрашивание по Цилю—Нильсену предназначено для выявления кислотоустойчивых микроорганизмов, прежде всего микобактерий, поэтому для идентификации сидерофагов оно не подходит.
| Объект или признак | Метод выявления | Результат | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Сидерофаги с гемосидерином | Реакция Перлса | Синие гранулы железа в цитоплазме макрофагов | Подтверждение внутриклеточного накопления гемосидерина |
| Гемосидерин | Берлинская лазурь в кислой среде | Образование ферриферроцианида синего цвета | Гистохимическая демонстрация трёхвалентного железа |
| Альвеолярные сидерофаги | Микроскопия бронхоальвеолярного лаважа с реакцией Перлса | Макрофаги с множественными железосодержащими гранулами | Признак повторных альвеолярных кровоизлияний или хронического застоя |
| Кислотоустойчивые микобактерии | Окрашивание по Цилю—Нильсену | Красные палочки на синем фоне | Диагностика микобактериальной инфекции, а не сидерофагов |
| Общая клеточная морфология | Окрашивание азур-эозином | Дифференцированная окраска ядер и цитоплазмы | Оценка клеточного состава без специфического выявления железа |
| Морфология клеток и микроорганизмов | Метиленовый синий | Сине-фиолетовое окрашивание ядерных и цитоплазматических структур | Ориентировочное цитологическое исследование |
Реакция Перлса выявляет именно железосодержащий пигмент, поэтому является специфическим гистохимическим критерием сидерофагов. Положительный результат следует интерпретировать с учётом клинических данных, локализации материала и признаков кровоизлияния или венозного застоя. В лёгочной цитологии большое количество сидерофагов имеет диагностическую ценность при подозрении на хроническое альвеолярное кровотечение. Отрицательная реакция не исключает макрофаги как таковые, а свидетельствует об отсутствии выявляемых запасов трёхвалентного железа.