2) пробирку с активатором свертывания
3) пробирку с этилендиаминтетрауксусной кислотой (+)
4) пробирку с флуоридом натрия
Для дифференциального подсчёта клеток в выпоте из плевральной, брюшной или перикардиальной полости используют пробирку с этилендиаминтетрауксусной кислотой (ЭДТА). ЭДТА хелатирует ионы кальция, необходимые для активации факторов коагуляции, поэтому предотвращает образование сгустка и фибриновых нитей, в которых могут задерживаться лейкоциты, эритроциты и опухолевые клетки. Это обеспечивает более равномерное распределение клеточных элементов и повышает достоверность общего и дифференциального подсчёта.
Антикоагулянт ЭДТА в рекомендуемой концентрации относительно хорошо сохраняет морфологию клеток, что важно для определения доли нейтрофилов, лимфоцитов, моноцитов, эозинофилов и других элементов при микроскопии или исследовании на гематологическом анализаторе. Материал после взятия аккуратно перемешивают без интенсивного встряхивания и как можно быстрее доставляют в лабораторию, поскольку длительное хранение приводит к дегенерации клеток и изменению их морфологических признаков. При наличии сгустка результаты клеточного подсчёта могут быть ложно заниженными.
Пробирка с активатором свертывания предназначена для получения сыворотки и не подходит для клеточного анализа, а флуорид натрия применяется преимущественно для стабилизации глюкозы. Гепарин может использоваться для отдельных исследований выпотов, однако для стандартного дифференциального подсчёта клеток предпочтительна ЭДТА, поскольку она эффективно препятствует коагуляции и поддерживает пригодность клеточной взвеси для морфологической оценки.
| Вид пробирки или добавки | Основной механизм | Оптимальное применение | Ограничения для подсчёта клеток в выпоте |
|---|---|---|---|
| ЭДТА | Связывает ионы кальция и блокирует каскад свертывания | Общий и дифференциальный подсчёт клеток, морфологическая оценка | При длительном хранении возможны дегенеративные изменения клеток; не является универсальной средой для биохимического анализа |
| Гепарин | Усиливает действие антитромбина и тормозит тромбин и фактор Xa | Некоторые биохимические, газовые и специальные исследования жидкостей | Может хуже подходить для морфологической оценки; возможны особенности окраски и фоновая интерференция |
| Активатор свертывания | Ускоряет образование сгустка для последующего отделения сыворотки | Исследование сывороточных биохимических показателей | Формирование сгустка удерживает часть клеток и делает клеточный подсчёт недостоверным |
| Флуорид натрия | Подавляет гликолиз и замедляет потребление глюкозы клетками | Стабилизация концентрации глюкозы в образце | Не предназначен для сохранения клеточной морфологии и проведения дифференциального подсчёта |
| Образец со сгустком | Фибриновая сеть механически захватывает клеточные элементы | Не используется для корректного клеточного анализа | Возможны ложно низкое число клеток и искажение лейкоцитарной формулы |
| Своевременная доставка материала | Ограничивает аутолиз и дегенерацию клеток | Повышает точность микроскопического и автоматизированного подсчёта | При задержке возрастает риск разрушения клеток и ошибочной классификации |
Результаты клеточного состава выпота интерпретируют совместно с клиническими данными, биохимическими показателями и микробиологическим исследованием. Преобладание нейтрофилов чаще указывает на острое воспаление, тогда как лимфоцитарный состав характерен для ряда хронических инфекционных, опухолевых и иммуновоспалительных процессов. Поэтому правильный выбор антикоагулянта является необходимым преаналитическим условием дифференциальной диагностики причин образования выпота.