2) аллергическая проба
3) ИФА, Вестерн-блот (+)
4) реакция агглютинации
Для выявления антител к ВИЧ применяют иммуноферментный анализ (ИФА) с последующим подтверждением специфичности реакции методом иммуноблоттинга, традиционно называемого Вестерн-блотом. В ИФА антитела пациента связываются с антигенами ВИЧ, фиксированными на твердой фазе, после чего образовавшийся иммунный комплекс выявляется ферментной меткой и субстратом. Метод обладает высокой чувствительностью и используется как скрининговый этап лабораторной диагностики.
Вестерн-блот позволяет подтвердить, что выявленные антитела направлены именно к белкам ВИЧ. Белки вируса разделяют электрофорезом, переносят на мембрану и инкубируют с сывороткой пациента; наличие антител выявляется в виде полос, соответствующих отдельным вирусным антигенам. Интерпретация проводится по установленным критериям: результат может быть положительным, отрицательным или неопределенным. Биологическая и аллергическая пробы не предназначены для диагностики ВИЧ-инфекции, а реакция агглютинации не является стандартным методом выявления антител к ВИЧ.
В современной лабораторной практике первичный скрининг часто выполняют комбинированными тестами четвертого поколения, одновременно выявляющими антитела к ВИЧ-1/ВИЧ-2 и антиген p24. При реактивном результате исследование подтверждают дифференцирующим иммунологическим тестом и, при необходимости, молекулярным выявлением РНК ВИЧ. Это особенно важно в период серологического окна , когда вирусная нуклеиновая кислота и антиген p24 уже могут определяться, а антитела еще отсутствуют.
| Метод | Что выявляет | Основное назначение | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| ИФА третьего поколения | Антитела IgM и IgG к антигенам ВИЧ | Скрининг образцов крови | Высокая чувствительность; реактивный результат требует подтверждения |
| Комбинированный тест четвертого поколения | Антитела к ВИЧ-1/ВИЧ-2 и антиген p24 | Раннее лабораторное выявление инфекции | Сокращает период диагностического окна по сравнению с тестами только на антитела |
| Вестерн-блот, или иммуноблоттинг | Антитела к отдельным белкам ВИЧ | Подтверждение специфичности реактивного скринингового результата | Положительный результат определяется сочетанием полос по установленным критериям |
| Дифференцирующий иммунологический тест | Антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2 | Уточнение типа выявленной ВИЧ-инфекции | Используется в современных алгоритмах подтверждения после реактивного скрининга |
| Молекулярный тест, ПЦР | РНК ВИЧ в плазме или цельной крови | Подтверждение ранней инфекции и разрешение неопределенных результатов | Позволяет выявлять инфекцию до формирования диагностически значимого уровня антител |
| Реакция агглютинации | Антигены или антитела в некоторых серологических системах | Диагностика отдельных инфекций и иммунологических состояний | Не является стандартным методом выявления антител к ВИЧ |
| Биологическая или аллергическая проба | Инфекционный процесс in vivo или реактивность организма | Специальные диагностические задачи при других заболеваниях | Для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции не применяется |
Таким образом, отмеченная комбинация ИФА и Вестерн-блота отражает классический двухэтапный принцип серологической диагностики: чувствительный скрининг с последующим подтверждением специфичности. Положительный скрининговый результат сам по себе не равен окончательному диагнозу и должен быть подтвержден в соответствии с действующим алгоритмом. Отрицательный результат также оценивают с учетом срока после возможного заражения и при необходимости повторяют исследование или дополняют его тестированием на РНК ВИЧ.