2) реакцию агглютинации
3) иммуноэлектрофорез
4) полимеразную цепную реакцию
Основным способом определения большинства онкомаркеров является иммунологическое выявление специфических антигенов, гормонов, ферментов или других белковых молекул в сыворотке, плазме, моче и других биологических материалах. Иммуноферментный анализ основан на специфическом связывании аналита с антителом и регистрации ферментативной реакции с субстратом; интенсивность окраски связана с концентрацией определяемого вещества. Иммунохимические методы используют тот же принцип антиген–антитело, но сигнал может регистрироваться хемилюминесцентным, электрохемилюминесцентным, флуоресцентным или иным способом.
Эти методики отличаются высокой аналитической чувствительностью, возможностью количественного измерения и автоматизации, поэтому применяются для определения ПСА, альфа-фетопротеина, РЭА, СА 125, СА 19-9, ХГЧ и других маркеров. Реакция агглютинации имеет более ограниченную чувствительность и преимущественно качественный или полуколичественный характер; иммуноэлектрофорез предназначен главным образом для разделения и характеристики белковых фракций. Полимеразная цепная реакция выявляет нуклеиновые кислоты и генетические изменения опухоли, поэтому относится к молекулярно-генетическим методам, а не к основным способам измерения классических белковых онкомаркеров.
| Метод | Что определяется | Принцип и диагностическая роль |
|---|---|---|
| Иммуноферментный анализ | Антигены, гормоны, ферменты, гликопротеины | Связывание аналита с антителом и ферментная регистрация реакции; позволяет получить количественный результат |
| Хемилюминесцентный и электрохемилюминесцентный анализ | Белковые и низкомолекулярные маркеры | Иммунный комплекс выявляется по световому сигналу; высокая чувствительность, широкий динамический диапазон и автоматизация |
| Иммунофлуоресцентный анализ | Антигены в биологических образцах и тканях | Регистрация флуоресценции меченого антитела; особенно полезен для локализации антигенов, но количественная оценка может быть ограничена |
| Реакция агглютинации | Крупные антигенные частицы или частицы-носители | Видимое образование агрегатов; метод прост, но обычно менее чувствителен и менее точен для количественного определения онкомаркеров |
| Иммуноэлектрофорез | Белковые фракции и иммуноглобулины | Разделение белков электрическим полем с последующей иммунной идентификацией; не является стандартным методом рутинного измерения большинства онкомаркеров |
| Полимеразная цепная реакция | ДНК или РНК опухолевых клеток, мутации, транскрипты | Амплификация специфического участка нуклеиновой кислоты; используется для молекулярной характеристики опухоли, а не для определения концентрации белкового маркера |
Концентрация онкомаркера не должна интерпретироваться как самостоятельное доказательство злокачественного новообразования. Повышение возможно при доброкачественных заболеваниях, воспалении, беременности и нарушении функции органов, участвующих в метаболизме или выведении маркера. Наибольшую клиническую ценность имеют результат в динамике, сопоставление с референсными интервалами, клинической картиной и данными визуализирующих и морфологических исследований. Стандартизованные иммуннохимические методы обеспечивают необходимую воспроизводимость такого лабораторного мониторинга.