2) отражения света
3) рассеивания света (+)
4) электропроводности
Нефелометрический метод основан на регистрации света, рассеянного частицами или структурными элементами исследуемой среды. При активации коагуляции растворимый фибриноген превращается в фибрин, формируются фибриновые нити и агрегаты, вследствие чего оптическая неоднородность плазмы увеличивается. Это вызывает изменение интенсивности рассеянного светового потока, которое прибор фиксирует фотодетектором.
Момент свертывания определяется как время от внесения активатора до достижения заданного порога изменения нефелометрического сигнала. Таким образом, нефелометрический коагулометр регистрирует не сам факт появления видимого сгустка, а оптические последствия полимеризации фибрина. Метод применяется для автоматизированного определения времени свертывания, в том числе при выполнении тестов протромбинового времени и активированного частичного тромбопластинового времени.
| Метод регистрации | Физический параметр | Изменение при формировании сгустка | Особенности |
|---|---|---|---|
| Нефелометрический | Интенсивность света, рассеянного под углом к падающему лучу | Обычно возрастает вследствие образования фибриновых структур | Высокая чувствительность к раннему формированию сгустка; результат зависит от оптических помех |
| Турбидиметрический | Снижение интенсивности света, прошедшего через образец | Раствор становится более мутным, пропускание света уменьшается | Оценивает изменение оптической плотности, а не рассеяние под определённым углом |
| Механический или вязкостный | Изменение вязкости и механического сопротивления образца | По мере образования сгустка движение металлического элемента или зонда затрудняется | Меньше зависит от окраски и мутности плазмы |
| Электромеханический | Изменение движения шарика или магнитного элемента в пробе | Сгусток ограничивает перемещение чувствительного элемента | Используется как альтернативный оптическому способ определения конечной точки |
| Визуальный капиллярный | Наблюдаемое прекращение текучести крови | Формируется видимый фибриновый сгусток | Прост, но субъективен и менее воспроизводим, чем автоматические методы |
| Тромбоэластографический | Изменение упругости и прочности сгустка во времени | Отражает не только начало коагуляции, но и ретракцию, лизис и прочность сгустка | Позволяет комплексно оценивать гемостаз, но не заменяет стандартные коагуляционные тесты |
На точность оптической регистрации могут влиять гемолиз, липемия, выраженная гипербилирубинемия, пузырьки воздуха и недостаточное перемешивание реагентов с плазмой. Поэтому результаты сопоставляют с референсным интервалом, методикой конкретного анализатора и условиями преаналитического этапа. При выраженных оптических помехах предпочтение может быть отдано механическому принципу детекции. Изменение рассеяния света является ключевым физическим признаком, связывающим нефелометрический сигнал с образованием фибринового сгустка.