2) лимфоцитов (+)
3) эритроцитов
4) эозинофилов
В 3-DIFF анализаторах, использующих кондуктометрический (импедансный, по принципу Коултера) метод, клетки классифицируются преимущественно по объёму и электрическому сопротивлению при прохождении через апертуру. После лизиса зрелых эритроцитов лейкоциты распределяются на три популяции: малые клетки, соответствующие преимущественно лимфоцитам, промежуточную группу MID и крупные гранулоциты. Такая классификация не определяет клеточную принадлежность по морфологическим или иммунологическим признакам.
Нормобласты являются ядерными предшественниками эритроцитов. В отличие от зрелых эритроцитов, они могут сохраняться после действия лизирующего реагента, а их размеры часто перекрываются с объёмом лимфоцитов. Поэтому в 3-DIFF анализаторе нормобласты регистрируются в зоне малых клеток и могут ошибочно включаться в лимфоцитарную фракцию, вызывая ложное повышение абсолютного числа лейкоцитов и лимфоцитов. Для уточнения результата используют исследование мазка периферической крови, анализатор с отдельным каналом подсчёта NRBC или 5-DIFF систему с более сложной идентификацией клеток.
| Популяция | Основной принцип распознавания | Типичная зона в 3-DIFF гистограмме | Особенности интерпретации |
|---|---|---|---|
| Лимфоциты | Малый клеточный объём и соответствующее изменение импеданса | Зона малых клеток | Основная популяция, формирующая лимфоцитарный пик |
| Нормобласты (NRBC) | Сохраняются после лизиса и имеют объём, перекрывающийся с лимфоцитами | Могут попадать в лимфоцитарную зону | Способны вызывать псевдолимфоцитоз и завышение общего числа лейкоцитов |
| Моноциты, эозинофилы, базофилы | Промежуточный размер клеток | MID-зона | В большинстве 3-DIFF систем не разделяются между собой |
| Нейтрофилы | Больший клеточный объём | Зона крупных клеток | Формируют гранулоцитарный пик |
| Зрелые эритроциты | Удаляются лизирующим реагентом перед подсчётом лейкоцитов | Не должны формировать лейкоцитарную популяцию | При неполном лизисе возможны дополнительные артефакты подсчёта |
| 5-DIFF анализаторы | Используют дополнительные оптические, цитохимические или флуоресцентные признаки | NRBC выделяются в отдельный канал или отдельную популяцию | Позволяют точнее определить лейкоциты и обнаружить нормобласты |
| Микроскопия мазка крови | Морфологическая идентификация ядра, цитоплазмы и степени созревания | Не зависит от положения клетки на импедансной гистограмме | Необходима при наличии флагов анализатора или подозрении на нормобластемию |
Нормобласты в периферической крови могут выявляться у новорождённых, при выраженной гипоксии, гемолизе, тяжёлых инфекциях и поражении костного мозга. При их значительном количестве расчёт лейкоцитарной формулы требует учёта возможного аналитического завышения. Обнаружение таких клеток должно быть подтверждено морфологически или методом, предусматривающим отдельное определение NRBC.