2) изоэлектрофокусирование
3) иммуноферментный анализ (+)
4) энзимодиагностика
Иммуноферментный анализ является одним из базовых методов неонатального скрининга врождённого гипотиреоза, поскольку позволяет быстро и одновременно исследовать большое число образцов. Материалом служит высушенная капля капиллярной крови на фильтровальной бумаге, взятая у новорождённого в установленные сроки. Метод основан на специфическом взаимодействии гормона с антителами, после чего ферментная метка образует окрашенный продукт; интенсивность сигнала используют для количественной оценки концентрации тиреотропного гормона (ТТГ) или тироксина.
Наиболее распространённая стратегия скрининга направлена на выявление повышенного ТТГ, что характерно для первичного врождённого гипотиреоза вследствие дисгенезии щитовидной железы или нарушения синтеза тиреоидных гормонов. При недостатке тироксина снижается отрицательная обратная связь с гипофизом, поэтому секреция ТТГ возрастает. Иммуноферментные и родственные им автоматизированные иммунометрические методы отличаются высокой производительностью, стандартизируемостью и пригодностью для работы с малым объёмом крови, что делает их оптимальными для массового обследования новорождённых.
| Показатель или этап | Материал и метод | Типичный результат | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Первичный скрининговый образец | Высушенная капля капиллярной крови; иммунологическое определение гормона | Получение количественного или полуколичественного результата | Позволяет обследовать практически всех новорождённых при минимальном объёме материала |
| Тиреотропный гормон | Иммуноферментный или иммунометрический анализ | Повышение концентрации ТТГ | Основной признак первичного врождённого гипотиреоза |
| Тироксин | Определение общего Т4, реже свободного Т4, иммунологическим методом | Снижение уровня Т4 | Подтверждает недостаточность тиреоидных гормонов; может использоваться как первичный или дополнительный маркер |
| Первичный врождённый гипотиреоз | Одновременная оценка ТТГ и Т4 | Высокий ТТГ и низкий Т4 | Наиболее типичный лабораторный профиль заболевания |
| Центральный гипотиреоз | Оценка Т4 с обязательным определением ТТГ | Низкий Т4 при низком, нормальном или недостаточно повышенном ТТГ | Может быть пропущен при скрининге, основанном только на ТТГ |
| Подтверждающая диагностика | Венозная кровь; сывороточные ТТГ и свободный Т4 | Подтверждение патологического результата скрининга | Необходима для постановки диагноза и немедленного решения вопроса о начале заместительной терапии левотироксином |
Положительный результат скрининга не равнозначен окончательному диагнозу и требует срочного повторного исследования венозной крови. Важно учитывать гестационный возраст, массу тела, время забора образца и переливание крови, поскольку эти факторы могут изменять концентрацию гормонов. Раннее подтверждение заболевания имеет принципиальное значение для предупреждения необратимого нарушения развития центральной нервной системы. Энзимная метка в иммуноферментном анализе обеспечивает чувствительную регистрацию реакции, а автоматизация делает метод пригодным для массовой лабораторной диагностики.