2) бактериологический (+)
3) биологический
4) бактериоскопический
Бактериологическое исследование является основным лабораторным методом подтверждения дифтерии, поскольку позволяет выделить из клинического материала возбудителя — Corynebacterium diphtheriae. Материал берут с поверхности поражённых участков ротоглотки, из носа и с границы налёта до начала антибактериальной терапии. После посева на элективные среды идентифицируют выделенную культуру, а затем определяют её токсигенность — способность продуцировать дифтерийный токсин.
Ключевым диагностическим критерием считается выделение токсигенного штамма C. diphtheriae. Токсигенность подтверждают реакцией преципитации в агаре (тест Элека), выявлением гена tox методом ПЦР с учётом необходимости оценки экспрессии токсина или современными эквивалентными методами. Бактериоскопия может обнаружить характерные грамположительные булавовидные палочки, но не позволяет надёжно подтвердить их вид и токсигенность; серологические и биологические исследования имеют вспомогательное или историческое значение.
| Метод | Что исследуют | Основной результат | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Бактериологический | Мазки из ротоглотки, носа, с поражённых участков | Выделение и идентификация C. diphtheriae | Основной метод подтверждения; дополняется определением токсигенности |
| Определение токсигенности | Выделенная культура | Продукция дифтерийного токсина или наличие функционально активного токсигенного штамма | Позволяет отличить эпидемиологически значимый штамм от нетоксигенного |
| ПЦР | ДНК микроорганизма в мазке или культуре | Обнаружение видоспецифических последовательностей и гена tox | Быстрый дополнительный метод; наличие гена не всегда означает его экспрессию |
| Бактериоскопический | Мазок, окрашенный по Граму или специальными методами | Грамположительные булавовидные палочки, располагающиеся под углом | Ориентировочный метод, недостаточен для подтверждения дифтерии |
| Серологический | Сыворотка крови, антитоксические антитела | Изменение титра антител или оценка иммунитета | Не подтверждает наличие возбудителя в остром очаге и не заменяет посев |
| Биологический | Биологическая активность токсина в экспериментальной системе | Цитотоксическое или летальное действие токсина | Исторический и специализированный подход, в рутинной диагностике обычно не применяется |
Отрицательный результат посева не исключает заболевание, если материал взят поздно, после начала антибиотикотерапии или с нарушением техники забора. При подозрении на дифтерию лечение и противоэпидемические мероприятия начинают по клиническим показаниям, не ожидая окончательного лабораторного заключения. Выявление нетоксигенной коринебактерии требует дифференциации с токсигенным штаммом и оценки клинической картины. Таким образом, именно бактериологическое выделение возбудителя с последующим подтверждением токсигенности обеспечивает этиологическую верификацию дифтерии.