2) серийных разведений (+)
3) Вейон-Виньяля
4) титрования по Грациа
Чувствительность бактерий к антибиотикам определяют методом серийных разведений, поскольку он позволяет количественно установить минимальную подавляющую концентрацию (МПК, MIC) препарата. Исследуемый антибиотик последовательно разводят в жидкой питательной среде или наносят в возрастающих концентрациях на агар, после чего вносят стандартизированную бактериальную суспензию. После инкубации оценивают наличие или отсутствие видимого роста: МПК соответствует наименьшей концентрации антибиотика, полностью подавляющей размножение микроорганизма.
Метод может быть выполнен в макро- или микроварианте, чаще с двукратными серийными разведениями в микропланшетах. При необходимости из пробирок или лунок без видимого роста делают пересев на питательную среду; минимальная концентрация, не оставляющая жизнеспособных бактерий, называется минимальной бактерицидной концентрацией (МБК, MBC). Полученные значения сопоставляют с клиническими пограничными концентрациями EUCAST или CLSI, на основании чего штамм относят к категориям чувствительный , чувствительный при увеличенной экспозиции или резистентный .
| Параметр | Характеристика |
|---|---|
| Основная цель | Количественное определение активности антибиотика в отношении конкретного бактериального изолята. |
| Принцип постановки | Последовательное разведение антибиотика с последующим внесением одинакового количества стандартизированной бактериальной культуры. |
| Стандартизация инокулюма | Используют суспензию определённой плотности, обычно эквивалентную 0,5 стандарту Мак-Фарланда, с последующим разведением по принятому протоколу. |
| МПК (MIC) | Наименьшая концентрация препарата, при которой отсутствует видимый рост бактерий в жидкой среде или на поверхности агара. |
| МБК (MBC) | Наименьшая концентрация антибиотика, после пересева из которой на питательной среде не появляется рост жизнеспособных микроорганизмов. |
| Клиническая интерпретация | Значение МПК сравнивают с эпидемиологическими и клиническими пограничными значениями; результат выражают как чувствительность или резистентность с учётом режима дозирования. |
| Преимущество | Высокая количественная информативность, возможность сравнения активности препаратов и оценки выраженной или пограничной устойчивости. |
| Ограничения | Результат зависит от плотности инокулюма, состава среды, времени инкубации, стабильности антибиотика и корректности считывания роста. |
Метод серийных разведений особенно важен при инфекциях, вызванных микроорганизмами с неоднозначными или пограничными профилями чувствительности. Его результаты помогают выбрать препарат и обосновать дозовый режим с учётом локализации инфекции и фармакокинетики антибиотика. В рутинной лабораторной практике метод может дополняться диско-диффузионным тестом или градиентно-диффузионным методом, однако именно разведения непосредственно дают значение МПК.