2) наличие спор, превышающих диаметр клетки (+)
3) наличие спор, не превышающих диаметр клетки
4) кислото- и спиртоустойчивость
Клостридии представляют собой грамположительные или грамвариабельные облигатно-анаэробные палочки, способные образовывать эндоспоры. У многих представителей рода зрелая спора располагается терминально или субтерминально и имеет диаметр больше поперечного размера вегетативной клетки. В результате клетка деформируется и приобретает характерный вид барабанной палочки или теннисной ракетки , особенно выраженный у Clostridium tetani.
Спорообразование является механизмом выживания бактерий при недостатке питательных веществ, воздействии кислорода, высушивании и других неблагоприятных условиях. Высокая устойчивость эндоспор связана с обезвоженным ядром, наличием кальция дипиколината и многослойных защитных оболочек. Морфологию спор оценивают при микроскопии с использованием специальных методов окраски, учитывая их расположение, форму и влияние на диаметр бактериальной клетки.
| Микроорганизм или группа | Основной морфологический признак | Дифференциально-диагностическое значение |
|---|---|---|
| Clostridium tetani | Круглая терминальная спора, значительно расширяющая клетку | Форма барабанной палочки является характерным ориентировочным признаком |
| Clostridium botulinum | Овальная субтерминальная спора, обычно превышающая диаметр клетки | Сочетание спорообразования с облигатно-анаэробным ростом отличает от аэробных бацилл |
| Clostridium perfringens | Крупные грамположительные палочки; споры выявляются непостоянно | Диагностика дополняется обнаружением капсулы, двойной зоны гемолиза и лецитиназной активности |
| Bacillus spp. | Эндоспоры обычно не вызывают выраженного расширения клетки | Большинство видов являются аэробами или факультативными анаэробами |
| Corynebacterium diphtheriae | Зёрна волютина в булавовидных клетках, спор нет | Метахроматические гранулы выявляют специальными методами окраски |
| Mycobacterium spp. | Тонкие неспорообразующие палочки с липидсодержащей клеточной стенкой | Характерна кислотоустойчивость при окраске по Цилю — Нильсену |
Выявление расширяющих клетку эндоспор служит важным ориентировочным признаком клостридий, но не заменяет культуральную и молекулярно-биологическую идентификацию. Для подтверждения учитывают анаэробный характер роста, биохимическую активность и продукцию специфических токсинов. Отсутствие видимых спор в отдельном препарате не исключает клостридиальную инфекцию, поскольку спорообразование зависит от вида микроорганизма и условий культивирования. Клинически значимые виды идентифицируют с соблюдением требований биологической безопасности.