2) светопропускания (+)
3) светоотражения
4) светопоглощения
Турбидиметрия основана на оценке интенсивности света, прошедшего через исследуемую суспензию или мутный раствор. Взвешенные частицы, преципитаты либо иммунные комплексы ослабляют прямой световой поток преимущественно за счёт его рассеяния; поэтому по степени снижения светопропускания судят о мутности образца и концентрации определяемого вещества. Чем выше содержание частиц в пределах рабочего диапазона метода, тем меньше интенсивность прошедшего света.
В клинической лабораторной диагностике этот принцип используется, в частности, в иммунотурбидиметрии: реакция антиген–антитело приводит к образованию нерастворимых или малорастворимых иммунных комплексов, а изменение светопропускания регистрируется фотометрически. Концентрацию аналита рассчитывают по калибровочной зависимости; измерение может быть конечным или кинетическим. Таким образом, правильным является ответ, связанный со светопропусканием, тогда как регистрация света, рассеянного под определённым углом, характерна прежде всего для нефелометрии.
Турбидиметрический сигнал выражают через пропускание или связанную с ним оптическую плотность. На результат влияют размер и форма частиц, их распределение в объёме, длина волны, оптический путь кюветы, время после смешивания реагентов и наличие посторонней мутности. Поэтому метод требует стандартизованных условий реакции и обязательного сравнения измеренного сигнала с калибраторами.
| Метод или показатель | Что регистрируется | Оптический принцип | Типичное применение |
|---|---|---|---|
| Турбидиметрия | Интенсивность света, прошедшего через образец | Ослабление прямого светового потока мутными частицами | Определение белков, иммунных комплексов, компонентов комплемента |
| Иммунотурбидиметрия | Изменение светопропускания после иммунной реакции | Образование комплексов антиген–антитело с последующим помутнением | С-реактивный белок, иммуноглобулины, микроальбумин |
| Нефелометрия | Свет, рассеянный частицами под заданным углом | Прямая регистрация бокового рассеяния, обычно под углом около 90° | Количественное определение иммуноглобулинов и других белков |
| Спектрофотометрия | Светопропускание или оптическая плотность раствора | Поглощение света растворёнными молекулами на выбранной длине волны | Определение ферментов, метаболитов, хромогенных продуктов реакций |
| Рефлектометрия | Интенсивность света, отражённого от тестовой поверхности | Отражение света сухим реагентным слоем или твердофазным носителем | Экспресс-анализ мочи, глюкозы и других показателей на тест-полосках |
| Кинетическая турбидиметрия | Скорость изменения светопропускания во времени | Регистрация динамики формирования или разрушения частиц в реакции | Автоматизированные коагулологические и иммунологические исследования |
Ключевым диагностическим признаком турбидиметрии является уменьшение доли света, проходящего через исследуемую среду. Метод особенно информативен при реакциях, сопровождающихся образованием дисперсной фазы или иммунных преципитатов. Для предотвращения аналитических ошибок необходимо учитывать гемолиз, липемию, иктеричность и другие факторы, изменяющие оптические свойства образца. Разграничение турбидиметрии и нефелометрии проводят по геометрии регистрации: первая оценивает прошедший свет, вторая — рассеянный.