2) красный
3) голубой или синий (+)
4) оранжевый
Реакция на берлинскую лазурь, или метод Перлса, выявляет трехвалентное железо (Fe3+) в тканях. В кислой среде феррицианид? Need correct: ferrocyanide = ferroцианид калия. Fe3+ reacts with ferrocyanide ions to form insoluble ferric ferrocyanide — берлинскую лазурь, Fe4[Fe(CN)6]3. Поэтому гранулы гемосидерина приобретают интенсивное голубое или синее окрашивание.
Гемосидерин представляет собой нерастворимый внутриклеточный пигмент, образующийся при агрегации и лизосомальной деградации ферритина; железо в нем находится преимущественно в форме Fe3+. В гистологических препаратах положительная реакция проявляется синими или сине-голубыми гранулами в макрофагах, эпителиальных клетках и других элементах тканей. Такой результат подтверждает наличие депонированного негемового железа и используется для диагностики локального или системного гемосидероза, последствий кровоизлияний и хронического венозного застоя.
Окрашивание принципиально отличается от выявления других тканевых пигментов, не содержащих доступного трехвалентного железа. Интенсивность реакции зависит от количества гемосидерина и особенностей фиксации материала; отрицательная реакция не исключает минимальные запасы железа или его преимущественно растворимую ферритиновую форму.
| Объект или пигмент | Химическая основа | Реакция Перлса | Морфологическое значение |
|---|---|---|---|
| Гемосидерин | Агрегированный ферритин с Fe3+ | Положительная; синие или сине-голубые гранулы | Локальное кровоизлияние, хронический застой, гемосидероз |
| Ферритин | Растворимый белковый комплекс депонирования железа | Возможна слабая или диффузная реакция | Физиологическое или умеренно повышенное хранение железа; при световой микроскопии обычно менее заметен, чем гемосидерин |
| Гемоглобин в интактных эритроцитах | Железо связано в составе гема | Обычно не дает типичной реакции Перлса | После распада эритроцитов железо высвобождается и может депонироваться в гемосидерине |
| Меланин | Пигмент тирозинового происхождения, железа не содержит | Отрицательная | Коричневое или черное окрашивание; дифференцируется от гемосидерина реакцией Перлса |
| Липофусцин | Окисленные липидно-белковые комплексы | Отрицательная | Желто-коричневые гранулы при старении и хроническом повреждении клеток |
| Билирубин и гематоидин | Безжелезистые продукты распада гема | Отрицательная | Желтые, золотистые или бурые кристаллические отложения в зоне старого кровоизлияния |
| Формалиновый пигмент | Артефакт фиксации, содержащий производные гемина | Не имеет типичного синего окрашивания | Буро-черные отложения, способные имитировать патологический пигмент |
Положительная реакция Перлса является гистохимическим критерием наличия тканевого железа, но сама по себе не устанавливает причину его накопления. Для определения этиологии учитывают распределение пигмента, признаки кровоизлияний или застоя, а также показатели обмена железа: ферритин, насыщение трансферрина и концентрацию сывороточного железа. При системном накоплении необходима оценка функции печени и других органов-мишеней. Сине-голубой цвет при этой реакции обусловлен именно образованием берлинской лазури, а не природной окраской гемосидерина.