2) турбидиметрический
3) гексокиназный (+)
4) химический
Количественное определение глюкозы в моче выполняют гексокиназным ферментативным методом. На первом этапе гексокиназа катализирует фосфорилирование глюкозы с образованием глюкозо-6-фосфата: глюкоза + АТФ → глюкозо-6-фосфат + АДФ. Далее в сопряжённой реакции с участием глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы образуется НАДФН, количество которого фотометрически измеряют при длине волны около 340 нм; интенсивность сигнала прямо пропорциональна концентрации глюкозы.
Метод отличается высокой аналитической специфичностью, поскольку основан на последовательности ферментативных реакций, связанных именно с метаболизмом глюкозы. Он позволяет получить числовое значение концентрации и использовать его для расчёта суточной экскреции глюкозы. В отличие от индикаторных тест-полосок с глюкозооксидазой, предназначенных преимущественно для скрининга и полуколичественной оценки, гексокиназный метод применяется для точного лабораторного измерения.
Турбидиметрические методы оценивают изменение мутности и не обладают специфичностью к глюкозе, а химические восстановительные реакции могут давать положительный результат при наличии других редуцирующих веществ, например аскорбиновой кислоты или некоторых лекарственных метаболитов. Поэтому именно гексокиназный метод рассматривается как обоснованный количественный подход к исследованию глюкозурии.
| Подход | Основной принцип | Характер результата | Специфичность к глюкозе | Диагностическое применение |
|---|---|---|---|---|
| Гексокиназный метод | Фосфорилирование глюкозы с последующим образованием НАДФН | Точное количественное значение | Высокая | Лабораторное подтверждение и количественная оценка глюкозурии |
| Глюкозооксидазный тест | Окисление глюкозы до глюконовой кислоты и перекиси водорода | Качественный или полуколичественный результат | Высокая, но возможны интерференции | Скрининг с помощью тест-полосок |
| Восстановительные химические реакции | Восстановление ионов металлов редуцирующими веществами | Обычно качественный или ориентировочно количественный результат | Низкая | Исторические методы; требуют подтверждения специфичным тестом |
| Турбидиметрия | Измерение рассеяния света мутной суспензией или образовавшимся осадком | Количественная оценка мутности | Не специфична | Определение частиц, белка или иммунных комплексов, но не стандартное измерение глюкозы |
| Нормогликозурия | Реабсорбция профильтрованной глюкозы преимущественно в проксимальном канальце | Глюкоза в моче отсутствует или определяется в следовых количествах | — | Физиологическое состояние при нормальной гликемии и сохранённом почечном пороге |
| Патологическая глюкозурия | Превышение почечного порога или снижение канальцевой реабсорбции | Повышенная экскреция глюкозы | — | Возможна при сахарном диабете, беременности и тубулоинтерстициальных поражениях |
Интерпретация глюкозурии должна проводиться одновременно с определением глюкозы крови и оценкой функции почек. При сахарном диабете она чаще отражает превышение почечного порога для глюкозы, тогда как при повреждении проксимальных канальцев может возникать при нормогликемии. Для расчёта суточной экскреции важны правильный сбор мочи и указание общего суточного объёма. Гексокиназное измерение обеспечивает наиболее надёжную количественную характеристику этого показателя.