2) ионов железа
3) солей кальция (+)
4) масс амилоида
Окраска по Косса применяется для выявления минеральных отложений, прежде всего фосфатов и карбонатов кальция, в тканях. Метод основан на обработке среза раствором нитрата серебра: ионы серебра замещают катионы в составе кальцийсодержащих солей, а под действием света восстанавливаются до металлического серебра, формируя чёрно-коричневый осадок. Поэтому реакция позволяет обнаружить участки минерализации при дистрофическом или метастатическом обызвествлении, хотя строго специфичной реакцией непосредственно на ионы кальция она не является.
Выраженность и локализация окраски оцениваются в контексте морфологических данных. При дистрофическом обызвествлении соли кальция откладываются в некротизированных или дегенеративно изменённых тканях при нормальном уровне кальция крови; при метастатическом — в относительно сохранённых тканях на фоне гиперкальциемии или нарушений фосфорно-кальциевого обмена. Перед исследованием важно учитывать, что декальцинация кислотами удаляет минеральный компонент и может сделать реакцию по Косса отрицательной.
| Метод или признак | Что выявляет | Результат и диагностическое значение |
|---|---|---|
| Окраска по Косса | Фосфаты и карбонаты, связанные с кальцием | Чёрно-коричневые участки минерализации; используется для подтверждения отложений кальциевых солей |
| Ализариновый красный S | Ионы кальция и кальциевые депозиты | Оранжево-красное окрашивание; дополнительный метод оценки кальцификации, особенно в экспериментальной и морфометрической практике |
| Реакция Перлса | Трёхвалентное железо | Синее окрашивание гемосидерина и других соединений железа; не используется для диагностики кальцинатов |
| Судановые красители, Oil Red O | Нейтральные липиды | Красное или оранжево-красное окрашивание жиров; исследование обычно проводят на замороженных срезах |
| Конго красный | Амилоид | Красное окрашивание в световой микроскопии и характерное яблочно-зелёное свечение в поляризованном свете |
| Гематоксилин и эозин | Общие морфологические изменения и базофильные минеральные массы | Кальцинаты выглядят как плотные синевато-фиолетовые глыбки, но специфичность ниже, чем у специальных реакций |
| Декальцинация перед окраской | Удаление солей кальция из костной и минерализованной ткани | После кислотной декальцинации реакция по Косса может исчезнуть; для сохранения минерала применяют щадящие методы, например ЭДТА |
Положительная реакция по Косса подтверждает наличие минерализованных участков и особенно полезна при оценке кальцификации мягких тканей, сосудистых стенок, клапанов сердца и зон некроза. Для разграничения дистрофического и метастатического обызвествления одной гистохимической реакции недостаточно: необходимы клинические данные и исследование фосфорно-кальциевого обмена. В костной ткани результат следует интерпретировать с учётом сохранности минерального матрикса и применённого метода фиксации или декальцинации.