2) мышечные клетки
3) нервные клетки (+)
4) коллагеновые волокна
Окрашивание по Нисслю предназначено для выявления нейронов, прежде всего их тел и дендритов. Основной краситель — толуидиновый синий, крезиловый фиолетовый или тионин — связывается с рибосомной РНК гранулярной эндоплазматической сети и рибосомами. Эти структуры образуют субстанцию Ниссля, или тигроид, поэтому цитоплазма нейрона приобретает выраженную базофилию, а ядро обычно хорошо контурируется и содержит заметное ядрышко.
Диагностическое значение метода связано с оценкой строения нервной ткани и состояния нейронов. Субстанция Ниссля располагается преимущественно в перикарионе и проксимальных отделах дендритов, но отсутствует в аксоне и аксонном холмике. При повреждении нейрона развивается хроматолиз: тигроидная субстанция уменьшается и смещается к периферии цитоплазмы, ядро эксцентрично перемещается; это может служить морфологическим признаком реактивных или дистрофических изменений нервных клеток.
Метод Ниссля не является специфическим способом окраски соединительнотканных волокон или мышечных клеток. Эластические волокна выявляют орсеином или фукселином, коллаген — трихромными методами, а мышечные структуры оценивают с помощью специальных иммуногистохимических маркеров и соответствующих гистологических окрашиваний. Поэтому обнаружение базофильных тел нейронов и тигроидной субстанции является главным критерием правильной интерпретации результата.
| Метод окрашивания | Преимущественно выявляемая структура | Основной диагностический признак |
|---|---|---|
| Метод Ниссля | Тела нейронов, дендриты, субстанция Ниссля | Базофильная зернистая цитоплазма вследствие связывания красителя с рибосомной РНК |
| Окраска гематоксилином и эозином | Общая тканевая архитектоника | Оценка ядер, цитоплазмы, воспаления, некроза и стромы без избирательного выявления тигроида |
| Импрегнация серебром по Гольджи | Отдельные нейроны и их отростки | Детализация формы тела клетки, дендритного дерева и аксона |
| Люксоловый прочный синий | Миелиновые оболочки нервных волокон | Оценка миелинизации и участков демиелинизации, а не тел нейронов |
| Окраска орсеином или резорцин-фуксином | Эластические волокна | Выраженное окрашивание эластических структур сосудистой стенки и соединительной ткани |
| Трихромные методы, например по Массону | Коллагеновые волокна и мышечная ткань | Дифференциальное окрашивание коллагена и мышечных элементов по цвету |
| Иммуногистохимия с нейрональными маркерами | Нейроны и их белковые дифференцировочные признаки | Экспрессия NeuN, MAP2, нейрофиламентов и других маркеров подтверждает нейрональную принадлежность |
Таким образом, положительная реакция по Нисслю отражает наличие богатой рибосомами гранулярной эндоплазматической сети в нейронах. Метод особенно полезен для подсчёта и морфологической оценки нервных клеток в сером веществе центральной нервной системы. По выраженности и распределению тигроида можно судить о сохранности нейрона и признаках хроматолиза. Окрашивание не предназначено для избирательной идентификации эластических, коллагеновых волокон или мышечных клеток.