2) селективность
3) низкий предел обнаружения
4) стабильность нулевой линии
УФ-детектор в жидкостной хроматографии регистрирует поглощение ультрафиолетового излучения веществом при определённой длине волны. Многие органические соединения содержат хромофорные группы — ароматические кольца, сопряжённые двойные связи, карбонильные и другие функциональные фрагменты, способные поглощать УФ-излучение. Поэтому одним таким детектором можно анализировать широкий спектр лекарственных веществ, пестицидов, фенолов, ароматических углеводородов, аминокислотных производных и других органических загрязнителей.
Количественное определение основано на законе Бугера—Ламберта—Бера: оптическая плотность пропорциональна концентрации вещества и длине оптического пути при постоянных условиях измерения. Практическая ценность УФ-детектора определяется сочетанием универсальности, простоты эксплуатации и совместимости с большинством элюентов, используемых в высокоэффективной жидкостной хроматографии. При этом детектор не является высокоселективным: одинаковое поглощение разных соединений может приводить к спектральному перекрыванию, а вещества, не имеющие выраженного хромофора, требуют дериватизации либо другого метода детектирования.
Низкий предел обнаружения характернее прежде всего для флуориметрического и масс-спектрометрического детектирования, а стабильность нулевой линии зависит от состава подвижной фазы, температуры, дегазации и качества оптической системы. Следовательно, главным преимуществом УФ-детектора считают не максимальную чувствительность или специфичность, а возможность определения большого числа органических соединений.
| Тип детектора | Физический принцип | Наиболее пригодные аналиты | Основная особенность |
|---|---|---|---|
| УФ-абсорбционный | Измерение поглощения УФ-излучения хромофором | Большинство органических соединений с ароматическими или сопряжёнными группами | Широкая область применения, простота и доступность |
| Диодно-матричный (DAD/PDA) | Одновременная регистрация поглощения в диапазоне длин волн | Органические вещества, позволяющие получать спектральные характеристики | Идентификация по УФ-спектру и контроль спектральной чистоты пика |
| Флуориметрический | Регистрация флуоресценции после возбуждения | Природно флуоресцирующие вещества и флуоресцентные производные | Высокая чувствительность и селективность, но ограниченный круг аналитов |
| Рефрактометрический | Измерение изменения показателя преломления элюата | Сахара, спирты, полимеры и вещества без УФ-хромофоров | Универсальность для некоторых классов, но меньшая чувствительность и температурная стабильность |
| Электрохимический | Измерение тока окисления или восстановления аналита | Электроактивные фенолы, катехоламины, некоторые лекарственные вещества | Высокая чувствительность при ограниченной химической применимости |
| Масс-спектрометрический | Регистрация ионов по отношению массы к заряду | Широкий спектр веществ, включая соединения без хромофоров | Высокая информативность и чувствительность, но большая сложность и стоимость |
Выбор длины волны проводят с учётом максимума поглощения аналита и минимального поглощения компонентов подвижной фазы. Для многокомпонентных проб полезен диодно-матричный режим, позволяющий сопоставлять спектры и оценивать однородность хроматографического пика. Если соединение практически не поглощает УФ-излучение, применение УФ-детектора без предварительной химической модификации не обеспечивает надёжного анализа.