2) экстракцию ацетоном (+)
3) перегонку с азотом
4) экстракцию этанолом
В методе Гуляевой ацетон применяют на этапе пробоподготовки как экстрагент этиленгликоля из биологического материала. Это полярный апротонный растворитель, хорошо смешивающийся с водой и способный проникать в тканевую матрицу, где этиленгликоль находится преимущественно в свободном, водорастворимом состоянии. Одновременно ацетон способствует осаждению белков, благодаря чему гликоль переходит в экстракт и освобождается от значительной части компонентов биоматериала.
Именно сочетание высокой растворяющей способности по отношению к этиленгликолю и эффективного разрушения белково-тканевой матрицы обеспечивает наибольший выход вещества — до 70% в условиях данной методики. Бензол имеет преимущественно неполярные свойства и плохо извлекает гидрофильный этиленгликоль. Этанол также способен растворять гликоль, однако в рамках метода Гуляевой он дает менее благоприятное соотношение выхода и соэкстракции матричных примесей. Перегонка с азотом не является экстракцией и малоэффективна для вещества с высокой температурой кипения — около 197 °C.
Полученный ацетоновый экстракт затем подвергают аналитическому исследованию, например газовой хроматографии, при необходимости после дериватизации. Сам факт обнаружения этиленгликоля следует оценивать вместе с клинико-лабораторными признаками отравления: метаболическим ацидозом с увеличенной анионной разницей, осмолярным разрывом, гипокальциемией и возможным обнаружением кристаллов оксалата кальция в моче.
| Подход или вещество | Физико-химическая характеристика | Особенности извлечения или анализа | Судебно-химическое значение |
|---|---|---|---|
| Ацетон | Полярный апротонный растворитель, смешивается с водой | Проникает в биоматериал, растворяет этиленгликоль и способствует осаждению белков | Оптимальный экстрагент по методу Гуляевой; извлечение может достигать 70% |
| Бензол | Неполярный органический растворитель | Плохо растворяет гидрофильные низкомолекулярные соединения, включая этиленгликоль | Не обеспечивает требуемого выхода и не используется как основной экстрагент в данной методике |
| Этанол | Полярный протонный растворитель, смешивается с водой | Способен извлекать гликоль, но может переносить значительное количество водорастворимых примесей | Не является оптимальным вариантом для достижения максимального выхода по методу Гуляевой |
| Перегонка с азотом | Газожидкостный перенос летучих компонентов | Этиленгликоль имеет высокую температуру кипения и низкую летучесть; возможна неполнота переноса | Не заменяет экстракцию ацетоном и не обеспечивает сопоставимого извлечения |
| Газовая хроматография | Инструментальный метод разделения и количественного определения | Исследует подготовленный экстракт; для повышения летучести может требоваться дериватизация | Подтверждает присутствие и позволяет определить концентрацию этиленгликоля |
| Клинико-токсикологическая корреляция | Оценка лабораторных последствий метаболизма этиленгликоля | Учитываются ацидоз, увеличение анионной разницы, осмолярный разрыв и оксалатурия | Помогает отличить отравление этиленгликолем от интоксикации другими спиртами |
Аналитическое извлечение не следует отождествлять с биодоступностью или степенью всасывания яда: показатель до 70% характеризует восстановление вещества из исследуемой матрицы. На поздних стадиях интоксикации концентрация исходного этиленгликоля может снижаться вследствие его метаболизма, поэтому отрицательный или низкий результат не исключает отравление без учета времени после приема. Основными токсичными метаболитами являются гликолевая и щавелевая кислоты, определяющие развитие ацидоза и поражения почек.