2) проводят пробоподготовку новой порции биообъекта (+)
3) используют пробу, оставшуюся после исследования арбитражными методами
4) используют пробу, оставшуюся после исследования предварительными методами
Для количественного анализа проводят пробоподготовку новой порции биообъекта. Количественное определение требует сохранения исходной концентрации вещества и строгого соблюдения валидированной методики: установленного объёма образца, соотношения с экстрагентом, времени и условий экстракции, внутреннего стандарта и калибровочной модели. Использование отдельной порции позволяет получить результат, отражающий содержание вещества в представленном объекте, а не изменения, возникшие после предыдущих аналитических процедур.
Оставшаяся после предварительного, подтверждающего или арбитражного исследования проба может быть частично израсходована, неоднородна, загрязнена реагентами либо подвергнуться сорбции, испарению, деградации или перераспределению определяемого соединения. Кроме того, остаток нередко не соответствует требованиям к минимальному объёму и гомогенизации. Поэтому результаты количественного анализа должны быть получены на самостоятельно отобранной и подготовленной порции того же биообъекта с соблюдением прослеживаемости, условий хранения и требований валидированной методики.
| Этап исследования | Основная задача | Особенности используемой порции | Допустимость для количественного анализа |
|---|---|---|---|
| Предварительное исследование | Быстрое выявление возможного присутствия вещества или группы веществ | Возможны реакции с неспецифическими реагентами и изменение состава образца | Остаток не используется как исходная порция для количественного определения |
| Подтверждающее исследование | Идентификация вещества по специфичным аналитическим признакам | Образец уже подвергался экстракции, очистке, дериватизации или иному воздействию | Для количественного анализа готовят новую порцию биообъекта |
| Арбитражное исследование | Разрешение разногласий или проверка спорного результата | Остаток может иметь ограниченный объём и изменённые физико-химические свойства | Не заменяет самостоятельную пробоподготовку новой порции |
| Количественный анализ | Установление концентрации или массовой доли вещества | Требуются точный навес или объём, гомогенизация, внутренний стандарт и калибровка | Проводится на новой порции биообъекта по валидированной методике |
| Внутренний стандарт | Контроль потерь вещества и эффективности пробоподготовки | Вводится в установленной концентрации до ключевых этапов обработки | Повышает достоверность расчёта концентрации |
| Контроль качества | Оценка правильности и воспроизводимости измерений | Используются холостые, контрольные и калибровочные образцы | Подтверждает аналитическую пригодность серии результатов |
Новая порция должна быть идентифицирована, надлежащим образом упакована и исследована с документированием всех этапов обращения. Выбор методики определяется видом биообъекта, предполагаемым аналитом и диапазоном концентраций. При недостаточном объёме материала вопрос о возможности исследования решается с учётом требований конкретной валидированной методики и правил судебно-экспертного хранения образцов.