2) конкурентного иммуноанализа
3) поляризационного флюороиммунного
4) гомогенного флуориметрического иммунологического (+)
Образование конъюгата глицина с феноксибензойной кислотой используется для получения специфического меченого аналога антигена — низкомолекулярного гаптена, способного участвовать в иммунной реакции. При взаимодействии этого конъюгата с антителами изменяются параметры его флуоресценции, что регистрируется непосредственно в исследуемой смеси. Поскольку разделение свободной и связанной фракций не требуется, метод относится к гомогенным флуориметрическим иммунологическим методам.
В практическом варианте анализа определяемое вещество и меченый конъюгат конкурируют за ограниченное количество специфических антител. Концентрацию аналита рассчитывают по изменению интенсивности флуоресцентного сигнала; направление изменения зависит от конструкции реагентной системы, но обычно увеличение содержания аналита уменьшает долю связанного меченого конъюгата и изменяет регистрируемую флуоресценцию. Радиоиммунный анализ требует радионуклидной метки, а поляризационный флюороиммуноанализ оценивает преимущественно степень поляризации света, поэтому указанные признаки не являются определяющими для данного ответа.
| Метод | Метка или измеряемый сигнал | Необходимость разделения фракций | Роль конъюгата | Основной принцип |
|---|---|---|---|---|
| Гомогенный флуориметрический иммунологический метод | Изменение интенсивности флуоресценции | Не требуется | Флуоресцентный аналог антигена, в том числе конъюгат глицина с феноксибензойной кислотой | Изменение сигнала при иммунном связывании и конкуренции с аналитом |
| Поляризационный флюороиммуноанализ | Степень поляризации флуоресцентного света | Не требуется | Флуорофорсодержащий антиген или гаптен | Изменение вращательной подвижности метки после связывания с антителом |
| Радиоиммунный анализ | Радиоактивность изотопной метки | Часто требуется | Радиоактивно меченый антиген | Конкуренция аналита и меченого антигена за антитела |
| Конкурентный иммуноанализ | Флуоресцентный, ферментный, хемилюминесцентный или иной сигнал | Зависит от формата | Меченый аналог аналита конкурирует с исследуемым веществом | Общее иммунологическое основание многих разновидностей анализа |
| Гетерогенный иммуноферментный анализ | Окрашивание или оптическая плотность продукта ферментной реакции | Требуется отмывание | Фермент-меченый антиген либо антитело | Регистрация сигнала после отделения связанной фракции |
| EMIT | Изменение активности фермента | Не требуется | Конъюгат аналита с ферментом | Связывание антитела изменяет доступность ферментного активного центра |
Таким образом, правильный ответ определяется сочетанием флуоресцентной регистрации и гомогенного формата исследования. Ключевым аналитическим событием является изменение свойств меченого конъюгата при его иммунном взаимодействии и конкуренции с определяемым веществом. Конкурентность характеризует механизм реакции, но не заменяет название конкретной инструментальной разновидности метода. Отсутствие этапа осаждения, отмывания или хроматографического разделения повышает скорость анализа и делает его пригодным для массового скрининга.