2) этанол 96%
3) водный раствор щелочи 10%
4) раствор натрия хлорида изотонический
Ксилол применяется для депарафинизации гистологических срезов, поскольку эффективно растворяет парафин и смешивается как с ним, так и с последующими спиртовыми средами. При обработке парафинового среза ксилол удаляет восковую пропитку из ткани, освобождая структуры клеток и межклеточного вещества для проникновения водных или спиртовых растворов красителей.
После удаления парафина препарат проводят через нисходящие концентрации этанола и затем в воду, то есть регидратируют. Этанол концентрации 96% используется преимущественно для обезвоживания и промежуточной обработки материала, но не является стандартным средством растворения парафина. Водный раствор щелочи и изотонический раствор натрия хлорида не обладают необходимыми свойствами для депарафинизации и применяются в других лабораторных целях.
| Этап обработки | Основной реагент | Назначение | Результат |
|---|---|---|---|
| Удаление парафина | Ксилол | Растворение парафиновой среды | Освобождение тканевых структур от воскового слоя |
| Промежуточное просветление | Ксилол или его заменитель | Замещение спирта перед заключением | Совместимость с гидрофобной средой для заключения |
| Обезвоживание | Этанол возрастающей концентрации | Удаление воды из ткани | Подготовка материала к пропитыванию парафином |
| Регидратация после депарафинизации | Этанол нисходящей концентрации и вода | Возвращение воды в ткань перед окраской | Возможность проведения стандартных водных методов окрашивания |
| Окраска гематоксилином и эозином | Водные или спиртовые растворы красителей | Выявление ядерных и цитоплазматических структур | Морфологическая оценка клеток и тканей |
| Щелочная обработка | Растворы щелочей | Специальная химическая обработка в отдельных методиках | Изменение химических свойств компонентов ткани, но не удаление парафина |
Качество депарафинизации является важным условием достоверного гистологического исследования: остатки парафина препятствуют проникновению красителей и могут ухудшать визуализацию тканевых структур. Обычно срез последовательно выдерживают в нескольких порциях ксилола, после чего проводят через спирты к воде. При работе с ксилолом необходимы вытяжная вентиляция, герметичная тара и соблюдение требований химической безопасности.