2) серологическом тесте (+)
3) реакции агглютинации
4) реакции связывания комплемента
Правильный ответ — серологический тест. МНС I класса представлены трансмембранными гликопротеинами HLA-A, HLA-B и HLA-C, экспрессируемыми практически на всех ядросодержащих клетках; исключение составляют зрелые эритроциты. Эти молекулы распознаются специфическими антителами, поэтому их аллельные варианты могут определяться методами серологического HLA-типирования.
Классическим вариантом является микролимфоцитотоксический тест: антитела к определённым HLA-антигенам связываются с лимфоцитами, после чего добавление комплемента вызывает повреждение и лизис клеток. Степень цитотоксичности регистрируют по проникновению красителя в погибшие клетки. Современные серологические подходы также включают иммунофлуоресцентные методы, проточную цитометрию и иммуноферментный анализ. Реакция розеткообразования характеризует клеточные рецепторы и принадлежность лимфоцитов, а обычная агглютинация и реакция связывания комплемента не являются стандартными методами определения HLA-антигенов.
| Метод | Основной принцип | Применение для МНС I класса | Диагностическая оценка |
|---|---|---|---|
| Серологическое HLA-типирование | Связывание специфических антител с антигенами HLA на поверхности клеток | Непосредственное выявление антигенов HLA-A, HLA-B, HLA-C | Положительный результат указывает на наличие соответствующего антигенного детерминанта |
| Микролимфоцитотоксический тест | Антитело связывается с клеткой, затем активируется комплемент | Классический вариант серологического определения HLA | Лизис клеток свидетельствует о реакции антиген–антитело |
| Проточная цитометрия | Регистрация флуоресцентно меченых антител, связанных с клеточной поверхностью | Определение экспрессии HLA I и количественная оценка её интенсивности | Позволяет анализировать отдельные клеточные популяции |
| Реакция розеткообразования | Формирование скоплений эритроцитов вокруг лимфоцитов с определёнными рецепторами | Не предназначена для типирования HLA-антигенов | Используется главным образом для характеристики субпопуляций лимфоцитов |
| Реакция агглютинации | Склеивание частиц или клеток при взаимодействии поверхностных антигенов и антител | Не является рутинным методом определения антигенов МНС I класса | Недостаточно специфична и чувствительна для стандартного HLA-типирования |
| Реакция связывания комплемента | Потребление комплемента иммунными комплексами | Не следует отождествлять с комплемент-зависимой HLA-цитотоксичностью | Не используется как основной самостоятельный тест HLA-типирования |
Определение МНС I класса имеет значение при подборе донора и реципиента для трансплантации, оценке иммунологической совместимости и исследовании ассоциаций HLA с заболеваниями. В клинической практике серологическое типирование во многих случаях дополнено или заменено молекулярно-генетическим исследованием генов HLA. Генетические методы позволяют выявлять конкретные аллели с большей разрешающей способностью, тогда как серологические тесты преимущественно определяют антигенные группы.