2) мелкие, гладкие, блестящие колонии с ровными краями
3) крупные, бесцветные колонии, напоминающие слизь
4) мелкие, плоские, темные колонии с приподнятым центром (+)
Правильный ответ — мелкие плоские тёмные колонии с приподнятым центром. Такая культуральная морфология характерна для биовара intermedius Corynebacterium diphtheriae при выращивании на среде Клауберга. Для него типичны небольшой размер колоний, плоский рельеф, тёмная окраска и центральное возвышение.
Среда Клауберга содержит теллурит, который подавляет рост части сопутствующей микрофлоры и восстанавливается коринебактериями до металлического теллура. Именно этим обусловлено серое или чёрное окрашивание колоний; их размер, форма, характер поверхности и рельеф используют для предварительного различения биоваров. У биовара gravis колонии крупные, шероховатые, с неровными краями, у mitis — мелкие, гладкие и блестящие, а у intermedius — мелкие плоские колонии с приподнятым центром.
Культуральные признаки на теллуритовой среде имеют ориентировочное диагностическое значение и не заменяют видовую и токсигенную идентификацию. Выделенный изолят подтверждают биохимическими или масс-спектрометрическими методами, а способность продуцировать дифтерийный токсин определяют выявлением гена tox и фенотипическим тестом на токсигенность, например реакцией преципитации в геле.
| Биовар или признак | Характеристика колоний на среде Клауберга | Дифференциальное значение |
|---|---|---|
| Intermedius | Мелкие, плоские, тёмные колонии с приподнятым центром | Морфологический признак, соответствующий отмеченному варианту ответа |
| Gravis | Крупные серо-чёрные, шероховатые колонии с неровными краями, часто радиально исчерченные | Типичный вид маргариток ; позволяет отличать от intermedius |
| Mitis | Мелкие, гладкие, блестящие, обычно выпуклые колонии с ровными краями | Отличается от intermedius прежде всего рельефом и характером поверхности |
| Belfanti | Чаще мелкие гладкие серо-чёрные колонии, морфологически близкие к биовару mitis | Культуральная морфология недостаточно специфична; необходимо дополнительное подтверждение |
| Восстановление теллурита | Формирование металлического теллура в колонии и её потемнение | Объясняет тёмную окраску колоний коринебактерий на теллуритсодержащей среде |
| Диагностическое значение | Предварительная оценка вида и биовара по размеру, цвету, краям, поверхности и рельефу колоний | Не доказывает наличие токсигенности и требует подтверждения лабораторными методами |
Обнаружение характерных колоний служит основанием для дальнейшего обследования культуры как возможного возбудителя дифтерии. Особое значение имеет исследование мазка из подозрительной колонии с оценкой грамположительных булавовидных палочек и метахроматических зёрен. Даже нетипичная морфология не исключает клинически значимый изолят, поэтому при соответствующей эпидемиологической ситуации исследование продолжают до определения токсигенности. Биовар сам по себе не предсказывает наличие токсина и не заменяет молекулярное или иммунологическое подтверждение.