2) поливинилпирролидон (+)
3) тяжелое масло
4) полиакриламид
При ИКСИ поливинилпирролидон (PVP) добавляют в среду для работы с инъекционной микропипеткой. Это водорастворимый инертный полимер, повышающий вязкость микрокапли: сперматозоиды перемещаются медленнее, легче захватываются и удерживаются в инъекционной пипетке. На практике окончательная иммобилизация обычно достигается механическим повреждением или сдавлением жгутика сперматозоида перед аспирацией, а PVP обеспечивает более контролируемое манипулирование гаметой.
Используют только эмбриологически валидированные, стерильные и физиологически сбалансированные растворы PVP с концентрацией, соответствующей протоколу лаборатории. Слишком высокая вязкость может затруднять аспирацию, промывание сперматозоида и его введение в ооцит, поэтому состав среды и время контакта стандартизируют. Поливинилпирролидон не является средством активации или отбора сперматозоидов; его основная функция при ИКСИ — снижение подвижности и облегчение микроманипуляции.
| Компонент или приём | Основная функция | Значение при ИКСИ |
|---|---|---|
| Поливинилпирролидон (PVP) | Повышение вязкости рабочей капли и снижение скорости движения сперматозоидов | Облегчает захват, ориентацию и аспирацию сперматозоида; является правильным ответом |
| Механическое обездвиживание жгутика | Нарушение движения сперматозоида контактом с инъекционной микропипеткой | Стандартный этап подготовки сперматозоида к введению в ооцит, дополняющий действие PVP |
| Тяжёлое минеральное масло | Формирование защитного слоя над культуральной средой | Предотвращает испарение и изменения осмолярности, но не используется для замедления сперматозоидов |
| Агароза | Гелеобразующая полисахаридная матрица | Может применяться в отдельных исследовательских или микроманипуляционных системах, но не является стандартным агентом снижения подвижности при ИКСИ |
| Полиакриламид | Синтетический материал для формирования гелей и экспериментальных субстратов | Не используется как стандартная среда для захвата и инъекции сперматозоидов в клинической эмбриологии |
| Среда для промывания сперматозоидов | Поддержание pH, осмолярности и жизнеспособности клеток | Предназначена для подготовки и переноса сперматозоидов, но обычно не обеспечивает необходимого замедления их движения |
Выбор PVP основан на его реологических свойствах: увеличение вязкости среды ограничивает свободное перемещение сперматозоида без формирования твёрдого геля. После введения сперматозоида в ооцит остатки вязкой среды по возможности удаляют промыванием. Контроль качества PVP включает оценку стерильности, эндотоксинов, осмолярности и влияния на выживаемость гамет и эмбрионов.