2) мясо-пептонный
3) щелочной
4) ТСВS (+)
Для первичной изоляции и дифференциации холерного вибриона используют агар TCBS — тиосульфатно-цитратный агар с желчными солями и сахарозой. Среда сочетает селективные и дифференциальные свойства: щелочная реакция, цитрат и желчные соли подавляют рост многих сопутствующих микроорганизмов, а сахароза позволяет выявлять способность вибрионов к ее ферментации.
Vibrio cholerae на TCBS-агаре обычно образует крупные, гладкие, выпуклые желтые колонии вследствие образования кислых продуктов при расщеплении сахарозы. Изменение окраски связано с работой индикаторов, прежде всего бромтимолового синего и тимолового синего. Однако культуральный признак не является окончательным: для подтверждения проводят микроскопию, тест на оксидазу, идентификацию вида и серогруппы, а также определение антигенов O1 или O139.
Кровяной и мясо-пептонный агары применяются преимущественно как универсальные среды для выращивания микроорганизмов и не обеспечивают необходимой дифференциации холерного вибриона. Щелочная пептонная вода является средой обогащения, а не дифференциальным плотным агаром; ее используют для увеличения концентрации вибрионов в исследуемом материале перед высевом.
| Среда или этап | Основное назначение | Диагностическое значение для V. cholerae |
|---|---|---|
| Агар TCBS | Селективно-дифференциальное выделение вибрионов | Желтые колонии при ферментации сахарозы; наиболее характерная первичная культуральная находка |
| Щелочная пептонная вода | Элективное накопление вибрионов из клинического материала | Повышает вероятность последующего выделения возбудителя, но не позволяет окончательно идентифицировать вид |
| Щелочной агар | Выделение микроорганизмов, предпочитающих щелочную реакцию среды | Поддерживает рост холерного вибриона, но обладает меньшей дифференцирующей ценностью, чем TCBS |
| Мясо-пептонный агар | Неспецифическое культивирование бактерий | Может обеспечивать рост вибриона, но не позволяет надежно отличить его от сопутствующей флоры |
| 5% кровяной агар | Оценка гемолиза и общих культуральных свойств | Не является стандартной дифференциальной средой для первичной идентификации V. cholerae |
| Биохимическое подтверждение | Видовая идентификация выделенной культуры | Оксидазоположительность, подвижность, биохимический профиль и агглютинация с диагностическими сыворотками уточняют принадлежность изолята |
Желтые колонии на TCBS следует рассматривать как основание для дальнейшего исследования, а не как самостоятельный диагноз. Некоторые другие виды вибрионов также ферментируют сахарозу и могут давать сходную окраску колоний. Окончательное заключение основывается на совокупности культуральных, биохимических и серологических признаков. При подозрении на холеру исследование проводят с соблюдением требований биологической безопасности и использованием валидированных лабораторных методик.