2) триметил-тетразолий хлористый
3) казеиновый годролизат
4) глюкоза (+)
Среда Хью–Лейфсона предназначена для определения характера использования углевода микроорганизмом — ферментативного или окислительного. Ее дифференцирующим субстратом является глюкоза: при ее метаболизме образуются кислые продукты, вызывающие снижение pH и изменение окраски индикатора среды. Поэтому именно наличие и характер утилизации глюкозы позволяют разделять бактерии по типу энергетического обмена.
Исследование проводят в двух параллельных пробирках с посевом культуры; одну из них обычно покрывают слоем стерильного вазелинового масла для ограничения доступа кислорода. При ферментативном расщеплении глюкозы подкисление и изменение цвета происходят в обеих пробирках, а при окислительном типе — преимущественно в аэробной, открытой пробирке. Отсутствие изменений указывает на неспособность штамма использовать глюкозу в данных условиях.
Фенилаланин применяется для выявления фенилаланиндезаминазы, триметил-тетразолий хлористый может выполнять роль окислительно-восстановительного индикатора в отдельных модификациях сред, а казеиновый гидролизат служит преимущественно источником азотистых и питательных компонентов. Ни один из этих компонентов не является основным углеводным субстратом, определяющим дифференциацию по типу метаболизма. Следовательно, правильный ответ — глюкоза.
| Результат в открытой пробирке | Результат в пробирке с ограниченным доступом кислорода | Интерпретация |
|---|---|---|
| Изменение цвета среды | Изменение цвета среды | Ферментативное использование глюкозы; образование кислоты независимо от наличия кислорода |
| Изменение цвета преимущественно в верхней части | Цвет практически не изменяется | Окислительное использование глюкозы; метаболизм связан с аэробным дыханием |
| Изменений нет | Изменений нет | Глюкоза не используется либо метаболическая активность недостаточна для подкисления среды |
| Желтая окраска | Желтая окраска | Снижение pH вследствие накопления кислых продуктов ферментации |
| Зеленая или синяя окраска | Зеленая или синяя окраска | Отсутствие значимого подкисления; исходная окраска индикатора сохраняется |
| Глюкоза | — | Основной дифференцирующий углеводный субстрат среды Хью–Лейфсона |
Оценивать результат следует в установленный срок, поскольку слабое подкисление у некоторых неферментирующих бактерий может быть малозаметным. Для корректной интерпретации важны плотность инокулюма, глубина посева и сопоставление обеих пробирок. Тест Хью–Лейфсона особенно полезен при дифференциации грамотрицательных палочек, включая энтеробактерии и неферментирующие бактерии. Полученные данные необходимо учитывать вместе с морфологическими, культуральными и биохимическими признаками изолята.