2) тест на чувствительность к желчи
3) экспресс-тест редукция триметил-тетразолия хлористого (+)
4) тест на каталазу и оксидазу
Правильный ответ основан на способности жизнеспособных бактериальных клеток восстанавливать соли тетразолия. Дегидрогеназные системы энтерококков переносят электроны на бесцветный или слабо окрашенный тетразолиевый реагент, в результате чего образуется окрашенный нерастворимый формазан. Появление окраски в экспресс-тесте свидетельствует о наличии метаболически активных бактерий в моче и позволяет использовать реакцию для быстрого выявления бактериурии.
Реакция с тетразолием является скрининговой и не заменяет видовую идентификацию. Для подтверждения энтерококковой природы возбудителя используют посев мочи с количественной оценкой роста, микроскопию грамположительных кокков, а также биохимические признаки: отрицательную каталазную реакцию, устойчивость к желчи, положительную реакцию с эскулином и, при необходимости, MALDI-TOF-масс-спектрометрию или молекулярные методы.
Нитритный тест менее пригоден, поскольку энтерококки обычно не обладают выраженной способностью восстанавливать нитраты до нитритов, поэтому при их наличии результат часто остается отрицательным. Каталазная и оксидазная реакции характеризуют отдельные ферментативные свойства, но не обеспечивают надежной детекции энтерококков непосредственно в моче. Рост в присутствии желчи является важным культуральным признаком, однако требует выделения микроорганизма и не относится к быстрому индикаторному тесту на бактериурию.
| Метод или признак | Биологический принцип | Значение при подозрении на энтерококки |
|---|---|---|
| Восстановление соли тетразолия | Восстановление реагента бактериальными дегидрогеназами с образованием окрашенного формазана | Положительная реакция указывает на присутствие жизнеспособных метаболически активных бактерий; используется как экспресс-скрининг |
| Нитритный тест | Выявление нитритов, образующихся при восстановлении нитратов | Может быть отрицательным при энтерококковой бактериурии из-за отсутствия или низкой активности нитратредуктазы |
| Толерантность к желчи | Способность сохранять рост в присутствии желчных солей | Поддерживает идентификацию энтерококков после выделения культуры, но не является самостоятельным быстрым тестом мочи |
| Гидролиз эскулина в присутствии желчи | Расщепление эскулина с образованием темного комплекса с ионами железа | Типичный дифференциально-диагностический признак энтерококков и других представителей группы D |
| Каталазная реакция | Расщепление перекиси водорода с выделением кислорода | Энтерококки обычно каталазоотрицательны; признак помогает отличать их от стафилококков, но не выявляет бактерии непосредственно в моче |
| Оксидазная реакция | Определение цитохром-c-оксидазы дыхательной цепи | Обычно отрицательна у энтерококков и имеет ограниченную диагностическую ценность для их видовой идентификации |
| Посев с количественным учетом | Выделение культуры и оценка числа колониеобразующих единиц с учетом клинической ситуации | Подтверждает бактериурию, позволяет идентифицировать Enterococcus spp. и определить чувствительность к антибиотикам |
Положительная реакция с тетразолием не доказывает инфекцию мочевых путей без учета клинических симптомов, качества забора материала и количественных результатов посева. Отрицательный результат также не исключает энтерококковую бактериурию при низкой концентрации микроорганизмов, недавней антибактериальной терапии или нарушении условий хранения образца. Окончательное заключение основывают на совокупности экспресс-данных, культурального исследования и клинико-лабораторных критериев.