2) микробиологический
3) серологический
4) молекулярно-генетический (+)
Молекулярно-генетическая диагностика выявляет нуклеиновую кислоту ВИЧ непосредственно в исследуемом образце. Поскольку ВИЧ является РНК-содержащим ретровирусом, наиболее распространённый метод — обратная транскрипция с последующей полимеразной цепной реакцией (ОТ-ПЦР), определяющая РНК вируса в плазме крови. В клеточном материале может исследоваться провирусная ДНК, интегрированная в геном инфицированных клеток.
К прямым признакам инфекции относятся обнаружение специфической последовательности генома ВИЧ и, при количественном исследовании, определение вирусной нагрузки. Нуклеиновая кислота может выявляться ещё до формирования диагностически значимого уровня антител, поэтому тесты амплификации нуклеиновых кислот особенно важны при острой инфекции и в период серологического окна. Результат оценивают с учётом чувствительности и специфичности тест-системы, типа образца и подтверждающего алгоритма.
Серологические методы преимущественно регистрируют иммунный ответ организма — антитела к ВИЧ, а комбинированные тесты также выявляют антиген p24; это не равно обнаружению генома вируса. Биологическое выделение вируса в культуре клеток технически возможно, но сложно, длительно и не используется как основной рутинный способ диагностики. Поэтому именно молекулярно-генетический подход наиболее точно соответствует критерию непосредственного выявления ВИЧ-инфекции по вирусному генетическому материалу.
| Метод | Что выявляется | Основное диагностическое значение | Ключевое ограничение |
|---|---|---|---|
| Молекулярно-генетический | РНК ВИЧ или провирусная ДНК | Прямое обнаружение генетического материала; ранняя диагностика и количественная оценка вирусной нагрузки | Возможны ложноположительные результаты при контаминации; требуется подтверждение по алгоритму |
| Серологический | Антитела к ВИЧ; в комбинированных тестах — также антиген p24 | Скрининг и лабораторное подтверждение инфекции после формирования иммунного ответа | Снижение информативности в период серологического окна |
| Биологический | Инфекционный вирус при заражении чувствительной клеточной культуры | Историческое или специализированное исследование биологических свойств вируса | Длительность, высокая техническая сложность и отсутствие рутинного применения |
| Микробиологический | Микроорганизм или его рост в культуре | Применим главным образом к культивируемым бактериям и грибам; для ВИЧ не является стандартным диагностическим подходом | ВИЧ не исследуется обычными бактериологическими методами |
| Качественная ПЦР | Факт наличия специфической последовательности ВИЧ | Подтверждение присутствия вирусного генетического материала | Не отражает количество вируса в образце |
| Количественная ПЦР | Концентрация РНК ВИЧ в плазме | Определение вирусной нагрузки, оценка эффективности антиретровирусной терапии и риска передачи | Результат зависит от калибровки тест-системы и корректности забора материала |
Молекулярно-генетическое исследование особенно ценно при подозрении на острую ВИЧ-инфекцию, когда антитела ещё не определяются. Отрицательный результат не исключает инфекцию при слишком раннем обследовании или низкой концентрации вирусной РНК, поэтому при сохраняющемся клиническом или эпидемиологическом риске исследование повторяют. Интерпретация должна проводиться совместно с результатами серологических тестов и данными о сроках возможного заражения.