2) биологическую пробу
3) кожно-аллергическую пробу
4) определение специфических антител
Для экспресс-диагностики чумы применяют реакцию иммунофлуоресценции (РИФ) непосредственно с исследуемым материалом: пунктатом из бубона, отделяемым язвы, мокротой, кровью или тканевыми фрагментами — в зависимости от клинической формы заболевания. Метод основан на связывании антигенов Yersinia pestis со специфическими антителами, меченными флуоресцентным красителем. При микроскопии выявляют характерное свечение иммунных комплексов, что позволяет быстро получить предварительное подтверждение наличия возбудителя.
Преимущество прямой РИФ заключается в коротком сроке выполнения и возможности исследовать клинический материал до выделения чистой культуры. Метод особенно важен при подозрении на бубонную, легочную или септическую форму чумы, когда ранняя лабораторная ориентировка необходима для немедленного начала противоэпидемических мероприятий и специфической терапии. Положительный результат РИФ расценивают с учетом клинической картины и эпидемиологических данных; окончательная верификация обычно проводится комплексно, с применением культуральных, молекулярно-генетических и иных подтверждающих методов.
Биологическая проба на восприимчивых лабораторных животных требует времени и относится к подтверждающим методам, а не к экспресс-диагностике. Кожно-аллергическая проба отражает сенсибилизацию организма и не позволяет надежно диагностировать острую инфекцию. Определение специфических антител имеет преимущественно ретроспективное значение, поскольку антительный ответ формируется не сразу и может отсутствовать в первые дни заболевания.
| Метод | Исследуемый материал | Что выявляет | Диагностическое значение и сроки |
|---|---|---|---|
| Прямая РИФ | Пунктат бубона, мокрота, кровь, отделяемое язвы, ткани | Антигенные структуры Y. pestis | Экспресс-метод; результат получают быстро, используется для первичной лабораторной ориентировки |
| Полимеразная цепная реакция | Клинический материал с предполагаемым содержанием возбудителя | Специфические фрагменты ДНК Y. pestis | Быстрое молекулярное подтверждение при наличии валидированной тест-системы |
| Бактериологическое исследование | Пунктат бубона, кровь, мокрота и другие стерильные или патологические материалы | Живую культуру возбудителя, ее свойства и чувствительность | Подтверждающий метод; требует специализированной лаборатории и строгого биологического режима |
| Биологическая проба | Подозрительный клинический материал | Способность материала вызвать инфекционный процесс у лабораторного животного | Вспомогательный подтверждающий метод; не относится к экспресс-диагностике |
| Серологическое исследование | Сыворотка крови в динамике | Специфические антитела к антигенам возбудителя | Ретроспективная диагностика; информативнее при исследовании парных сывороток |
| Кожно-аллергическая проба | Кожа пациента после внутрикожного введения специфического аллергена | Клеточную сенсибилизацию к антигенам чумного микроба | Не предназначена для подтверждения острой чумы и не используется как основной экспресс-тест |
При подозрении на чуму забор материала проводят до начала антибактериальной терапии, не нарушая требований противоэпидемической безопасности. Любой положительный результат РИФ должен оцениваться совместно с клиническими и эпидемиологическими признаками заболевания. Исследования выполняют в лабораториях, допущенных к работе с особо опасными инфекциями. Раннее выявление антигена позволяет своевременно изолировать пациента, начать лечение и организовать обследование контактных лиц.