2) агар Борде – Жонгу (+)
3) культуры клеток
4) среды с теллуритом калия
Для выделения Bordetella pertussis применяют агар Борде—Жангу — обогащённую картофельно-кровяную среду с глицерином. Возбудитель коклюша представляет собой мелкий грамотрицательный неподвижный коккобацилл, требовательный к условиям культивирования и медленно растущий. На этой среде через несколько суток формируются небольшие гладкие блестящие колонии, напоминающие каплю ртути; возможен узкий зональный гемолиз.
Материалом служит отделяемое из носоглотки, которое желательно брать в первые недели заболевания и до начала антибактериальной терапии. Посев выполняют непосредственно у постели пациента или доставляют материал в лабораторию с минимальной задержкой, поскольку B. pertussis плохо сохраняется во внешней среде. В современной практике также используют угольно-кровяной агар Ригана—Лоу, а для ускоренной диагностики — ПЦР; однако классической питательной средой для культивирования возбудителя в тестовом вопросе является агар Борде—Жангу.
Среды с лактозой предназначены преимущественно для дифференциации энтеробактерий по ферментации углевода и не обеспечивают необходимых условий для коклюшной палочки. Культуры клеток применяют главным образом для вирусов и некоторых внутриклеточных микроорганизмов, тогда как B. pertussis культивируется на искусственных питательных средах. Теллуритовые среды селективны прежде всего для выделения Corynebacterium diphtheriae, поэтому к диагностической культивации возбудителя коклюша не относятся.
| Среда или метод | Основное назначение | Применение при коклюше | Диагностическое значение |
|---|---|---|---|
| Агар Борде—Жангу | Выделение требовательных бордетелл | Основная классическая среда для B. pertussis | Рост мелких блестящих колоний через 3–7 суток |
| Угольно-кровяной агар Ригана—Лоу | Современная селективная изоляция бордетелл | Используется наряду с агаром Борде—Жангу | Повышает вероятность выделения возбудителя из носоглоточного материала |
| Лактозные среды | Дифференциация бактерий по ферментации лактозы | Для рутинного выделения B. pertussis не применяются | Характерны для работы с энтеробактериями |
| Среды с теллуритом калия | Селективное выделение коринебактерий | Не являются средой выбора для коклюшной палочки | Почернение колоний типично для некоторых штаммов C. diphtheriae |
| Культуры клеток | Размножение вирусов и внутриклеточных агентов | Не используются для стандартного выделения B. pertussis | Не соответствуют биологическим особенностям бордетеллы |
| ПЦР | Молекулярное выявление ДНК возбудителя | Применяется для быстрой диагностики коклюша | Более чувствительна, но не заменяет характеристику живой культуры |
Положительный результат посева подтверждает наличие жизнеспособной B. pertussis, однако отрицательный результат не исключает коклюш, особенно при позднем взятии материала или после антибиотикотерапии. Наиболее информативным материалом является глубокий назофарингеальный мазок или аспират, а не мазок из ротоглотки. Выбор специализированной среды обусловлен требовательностью возбудителя и его низкой конкурентоспособностью по отношению к нормальной микрофлоре носоглотки.