2) висмут-сульфитный
3) трипказо-соевый (+)
4) желточно-солевой
Правильный ответ — трипказо-соевый агар (TSA). Это универсальная питательная среда с пептонными компонентами, обеспечивающая восстановление и обильный рост бактерий рода Listeria, в том числе клеток, повреждённых при воздействии селективных компонентов первичной среды. Пересев характерной колонии на TSA необходим для получения чистой культуры и накопления биомассы перед проведением подтверждающих исследований; в практических протоколах может использоваться TSA с добавлением дрожжевого экстракта.
TSA не является строго дифференциальной средой, поэтому принадлежность изолята к Listeria устанавливают комплексно. Для листерий характерны грамположительные короткие палочки или коккобациллы, каталазоположительная реакция, мелкая серовато-беловатая колония и, у Listeria monocytogenes, узкая зона β-гемолиза на кровяном агаре. Дополнительными критериями служат характерная кувыркающаяся подвижность при исследовании нативного препарата и зонтичный рост в полужидкой среде при комнатной температуре.
Остальные варианты предназначены преимущественно для выделения или дифференциации других групп микроорганизмов. Цитратный агар применяют для оценки утилизации цитрата, висмут-сульфитный — главным образом для селективного выделения сальмонелл, а желточно-солевой агар используют при исследовании стафилококков, включая выявление лецитиназной активности. Поэтому для подтверждающего пересева подозрительных колоний листерий выбирают питательную, неселективную основу TSA.
| Среда или метод | Основное назначение | Значение при идентификации Listeria |
|---|---|---|
| Трипказо-соевый агар | Восстановление, накопление биомассы и получение чистой культуры | Оптимален для пересева подозрительной колонии и последующих биохимических и микроскопических тестов |
| Кровяной агар | Оценка гемолитической активности | Для L. monocytogenes характерен узкий β-гемолиз; результат оценивают вместе с другими признаками |
| Селективные среды для листерий, включая Oxford и PALCAM | Первичное выделение листерий из клинического или пищевого материала | Подавляют сопутствующую микрофлору и позволяют отобрать подозрительные колонии для дальнейшего пересева |
| Полужидкая среда для определения подвижности | Исследование характера роста бактерий в толще агара | Зонтичная подвижность при комнатной температуре поддерживает идентификацию листерий |
| Висмут-сульфитный агар | Селективное выделение преимущественно сальмонелл | Не является стандартной средой подтверждающего пересева колоний Listeria |
| Цитратный агар | Определение способности микроорганизма использовать цитрат как источник углерода | Не предназначен для первичной идентификации или накопления листерий |
| Желточно-солевой агар | Выделение и дифференциация стафилококков по устойчивости к соли и лецитиназной активности | Не соответствует диагностической задаче при подозрении на Listeria |
После пересева на TSA чистую культуру исследуют окраской по Граму, на каталазу, подвижность и гемолиз. Для видовой идентификации L. monocytogenes могут применяться биохимические панели, MALDI-TOF-масс-спектрометрия или молекулярные методы. Таким образом, TSA выполняет прежде всего функцию восстановительной и поддерживающей среды, создавая условия для достоверной последующей идентификации.