2) среда Левенштейна – Йенсена (+)
3) фосфатный буфер
4) желточно-солевой агар
Среда Левенштейна–Йенсена является плотной яичной элективной средой, применяемой для первичного выделения микобактерий туберкулёзного комплекса. В её состав входят минеральные соли, аспарагин, глицерин, яичная масса и малахитовый зелёный. Последний подавляет рост сопутствующей бактериальной и грибковой микрофлоры, тогда как микобактерии благодаря особенностям клеточной стенки, богатой миколовой кислотой, сохраняют способность к размножению.
Mycobacterium tuberculosis относится к медленнорастущим кислотоустойчивым бактериям. На среде Левенштейна–Йенсена рост обычно выявляют через 3–8 недель инкубации при 35–37 °C в виде сухих, шероховатых, кремово-бежевых колоний типа бутона цветной капусты . Культуральное выделение имеет принципиальное значение для подтверждения туберкулёзной инфекции и последующего определения лекарственной чувствительности, однако видовую идентификацию проводят дополнительно с помощью молекулярно-генетических или иммунологических методов.
Остальные перечисленные среды не соответствуют назначению: фосфатный буфер используется преимущественно как раствор для транспортировки или обработки материала, желточно-солевой агар селективен главным образом для стафилококков, а угольно-дрожжевые среды применяются для отдельных требовательных бактерий, но не являются стандартными средами выделения M. tuberculosis.
| Среда или метод | Основное назначение | Ключевая особенность | Роль при исследовании на туберкулёз |
|---|---|---|---|
| Левенштейна–Йенсена | Культивирование микобактерий | Яичная основа и малахитовый зелёный; подавление контаминирующей флоры | Стандартная плотная элективная среда для выделения M. tuberculosis |
| Middlebrook 7H10/7H11 | Культивирование микобактерий | Определённый агаризованный состав; возможна оценка морфологии колоний и чувствительности | Альтернативные плотные среды, особенно в специализированных лабораториях |
| Фосфатный буфер | Разведение, отмывание и транспортировка материала | Не содержит питательных компонентов в концентрации, достаточной для роста микобактерий | Не является питательной или элективной средой |
| Желточно-солевой агар | Выделение и дифференциация стафилококков | Высокая концентрация соли и компоненты желтка | Для первичного выделения M. tuberculosis не применяется |
| Угольно-дрожжевой агар | Культивирование отдельных требовательных бактерий | Обогащённая среда, поддерживающая рост специализированных возбудителей | Не является стандартной средой для микобактерий туберкулёзного комплекса |
| Жидкие автоматизированные системы | Ускоренное обнаружение роста микобактерий | Регистрация изменений метаболизма или потребления кислорода | Позволяют выявить рост раньше, чем на плотных средах, и используются совместно с идентификацией |
Культуральное исследование проводят в лабораториях, соответствующих требованиям биологической безопасности, поскольку аэрозоли, содержащие M. tuberculosis, эпидемиологически опасны. Отрицательный результат на плотной среде не исключает туберкулёз при малом количестве возбудителя или предшествующей терапии; его оценивают вместе с микроскопией, молекулярными тестами и клинико-рентгенологическими данными. Выделение культуры также позволяет выполнить фенотипическое или молекулярное тестирование лекарственной устойчивости.