2) метиленовая синь (+)
3) основной фуксин
4) метиленовый красный
В среде молоко с метиленовым синим индикатором является метиленовая синь — окислительно-восстановительный индикатор. В присутствии кислорода она находится в окисленной форме и окрашивает молочную среду в синий цвет. При активном размножении микроорганизмов кислород расходуется, а образующиеся восстановительные эквиваленты переводят краситель в бесцветную лейкоформу.
Обесцвечивание молока служит косвенным показателем интенсивности метаболизма и бактериальной обсеменённости: чем быстрее исчезает синяя окраска, тем выше, как правило, количество жизнеспособных микроорганизмов и их восстановительная активность. Время обесцвечивания оценивают при стандартизованных условиях инкубации; результат зависит не только от числа клеток, но и от видовых особенностей микрофлоры, доступности кислорода и температуры.
Другие перечисленные вещества выполняют иные функции. Люголь используется как йодсодержащий реактив, в частности для выявления крахмала; основной фуксин преимущественно применяют как краситель в бактериологических методиках; метиленовый красный является индикатором кислотопродукции в тесте MR и изменяет цвет при значительном снижении pH. Поэтому именно метиленовая синь соответствует принципу действия данной молочной индикаторной среды.
| Реактив или индикатор | Основное свойство | Изменение при реакции | Типичное применение |
|---|---|---|---|
| Метиленовая синь | Окислительно-восстановительный индикатор | Синий цвет в окисленном состоянии, обесцвечивание при восстановлении | Оценка восстановительной активности микрофлоры и качества молока |
| Резазурин | Окислительно-восстановительный индикатор | Переход от синего или фиолетового к розовому и далее к бесцветному при восстановлении | Экспресс-оценка бактериальной обсеменённости молока |
| Метиленовый красный | Кислотно-основный индикатор | Красное окрашивание при накоплении устойчивых кислых продуктов | Тест MR для выявления смешанного кислотного брожения |
| Люголь | Раствор йода и йодида калия | Сине-фиолетовое окрашивание при взаимодействии с крахмалом | Выявление крахмала, окрашивание и дифференциация некоторых структур |
| Основной фуксин | Основной анилиновый краситель | Интенсивное окрашивание клеток или компонентов мазка | Окраска по Цилю—Нильсену и использование в селективных питательных средах |
| Феноловый красный | Кислотно-основный индикатор | Переход от красно-оранжевого к жёлтому при подкислении среды | Выявление ферментации углеводов с образованием кислоты |
Метиленовая синь в молочной пробе отражает прежде всего окислительно-восстановительное состояние среды, а не изменение её кислотности. Сохранение синей окраски указывает на наличие растворённого кислорода и отсутствие выраженного восстановления в течение оцениваемого периода. Обесцвечивание необходимо интерпретировать с учётом контроля, температуры и времени инкубации. Метод является ориентировочным санитарно-микробиологическим тестом и не заменяет количественное определение микроорганизмов и их видовую идентификацию.